NCI-H820

Az NCI-H820 egy humán nem kissejtes tüdőrák (NSCLC) sejtvonal, amely egy felnőtt beteg tüdőadenokarcinómájából származik. Ez a sejt az NCI tüdőrák paneljének része, és egyedi genetikai jellemzői miatt széles körben használják a célzott terápiák kutatásában. Morfológiailag a sejtek epithelialis jellegzetességeket mutatnak, és tapadó monorétegként növekednek. Általában 10% magzati szarvasmarha szérummal kiegészített RPMI-1640 tápfolyadékban tenyésztik őket, és standard sejttenyésztési körülmények között tartják őket (37°C, 5% CO₂).

Genetikailag az NCI-H820 az EGFR 19. exonjának deléciós mutációjával (E746-A750del) rendelkezik, amely egy gyakori aktiváló mutáció, amely az EGFR tirozinkináz-inhibitorokkal (TKI-k) szembeni érzékenységgel jár. Ugyanakkor rendelkezik egy másodlagos EGFR T790M mutációval is, amely az első generációs TKI-kkel - például az erlotinib és a gefitinib - szembeni szerzett rezisztencia jól ismert mechanizmusa. Ez a kettős mutációs státusz teszi az NCI-H820-at rendkívül releváns modellé a rezisztencia mechanizmusok vizsgálatához és a harmadik generációs EGFR-gátlók, például az osimertinib értékeléséhez, amelyek képesek legyőzni a T790M által közvetített rezisztenciát.

Az EGFR-mutációkon kívül az NCI-H820-at autokrin jelátviteli hurkok és növekedési faktor-receptor útvonalak tanulmányozására is használták. A kutatások kimutatták, hogy expresszálja az I. típusú inzulinszerű növekedési faktor receptort (IGF-1R), ami hozzájárul a túlélési és proliferációs jelátvitelhez. Kettős mutációs profilja és a receptor-tirozin-kinázok expressziója értékes eszközzé teszi a gyógyszerrezisztenciára, a kombinált terápiás stratégiákra és az EGFR-mutáns NSCLC személyre szabott kezelési megközelítéseinek kifejlesztésére összpontosító preklinikai vizsgálatokban.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban