NCI-H820

NCI-H820 è una linea cellulare umana di cancro al polmone non a piccole cellule (NSCLC) derivata da un adenocarcinoma polmonare di un paziente adulto. Fa parte del pannello NCI sul cancro del polmone ed è stata ampiamente utilizzata nella ricerca sulle terapie mirate grazie alle sue caratteristiche genetiche uniche. Morfologicamente, le cellule presentano caratteristiche epiteliali e crescono come monostrati aderenti. Sono generalmente coltivate in terreno RPMI-1640 integrato con il 10% di siero fetale bovino e mantenute in condizioni di coltura cellulare standard (37°C, 5% di CO₂).

Dal punto di vista genetico, NCI-H820 si distingue per la presenza di una mutazione dell'esone 19 dell'EGFR (E746-A750del), una comune mutazione attivante associata alla sensibilità agli inibitori della tirosin-chinasi dell'EGFR (TKI). Tuttavia, possiede anche una mutazione secondaria EGFR T790M, che è un meccanismo consolidato di resistenza acquisita ai TKI di prima generazione come erlotinib e gefitinib. Questo stato di doppia mutazione rende NCI-H820 un modello estremamente rilevante per lo studio dei meccanismi di resistenza e per la valutazione degli inibitori di EGFR di terza generazione, come osimertinib, che possono superare la resistenza mediata da T790M.

Oltre che per le mutazioni dell'EGFR, l'NCI-H820 è stato utilizzato per studiare i loop di segnalazione autocrina e i percorsi dei recettori dei fattori di crescita. La ricerca ha dimostrato che esprime il recettore del fattore di crescita insulino-simile di tipo I (IGF-1R), contribuendo alla segnalazione della sopravvivenza e della proliferazione. Il suo profilo di doppia mutazione e l'espressione di tirosin-chinasi recettoriali lo rendono uno strumento prezioso negli studi preclinici incentrati sulla resistenza ai farmaci, sulle strategie di terapia combinata e sullo sviluppo di approcci terapeutici personalizzati per il NSCLC mutante EGFR.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia