NCI-H820

NCI-H820 er en human ikke-småcellet lungekreftcellelinje (NSCLC) som stammer fra et lungeadenokarsinom fra en voksen pasient. Den er en del av NCIs lungekreftpanel og har blitt mye brukt i forskning på målrettede terapier på grunn av sine unike genetiske egenskaper. Morfologisk sett har cellene epiteliale egenskaper og vokser som adherente monolag. De dyrkes vanligvis i RPMI-1640-medium supplert med 10 % føtalt bovint serum og holdes under standard cellekulturforhold (37 °C, 5 % CO₂).

Genetisk sett er NCI-H820 kjent for å ha en EGFR-ekson 19-delesjonsmutasjon (E746-A750del), en vanlig aktiverende mutasjon som er forbundet med følsomhet for EGFR-tyrosinkinasehemmere (TKI-er). Den har imidlertid også en sekundær EGFR T790M-mutasjon, som er en veletablert mekanisme for ervervet resistens mot førstegenerasjons TKI-er som erlotinib og gefitinib. Denne doble mutasjonsstatusen gjør NCI-H820 til en svært relevant modell for å undersøke resistensmekanismer og for å evaluere tredjegenerasjons EGFR-hemmere som osimertinib, som kan overvinne T790M-mediert resistens.

I tillegg til EGFR-mutasjonene har NCI-H820 blitt brukt til å studere autokrine signalløkker og vekstfaktorreseptorveier. Forskning har vist at den uttrykker type I insulinlignende vekstfaktorreseptor (IGF-1R), noe som bidrar til overlevelse og proliferasjonssignalering. Den doble mutasjonsprofilen og uttrykket av reseptortyrosinkinaser gjør den til et verdifullt verktøy i prekliniske studier med fokus på legemiddelresistens, strategier for kombinasjonsbehandling og utvikling av persontilpassede behandlingsmetoder for EGFR-mutant NSCLC.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring