NCI-H820

NCI-H820 je lidská buněčná linie nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) odvozená z adenokarcinomu plic dospělého pacienta. Je součástí panelu NCI pro karcinom plic a díky svým jedinečným genetickým vlastnostem je hojně využívána ve výzkumu cílené léčby. Morfologicky buňky vykazují epiteliální vlastnosti a rostou jako adherentní monovrstvy. Obvykle se kultivují v médiu RPMI-1640 doplněném 10% fetálním hovězím sérem a udržují se za standardních podmínek buněčné kultivace (37 °C, 5 % CO₂).

Z genetického hlediska je NCI-H820 význačná tím, že obsahuje deleční mutaci exonu 19 EGFR (E746-A750del), což je běžná aktivační mutace spojená s citlivostí na inhibitory tyrozinkinázy EGFR (TKI). Je však také nositelem sekundární mutace EGFR T790M, která je dobře známým mechanismem získané rezistence k TKI první generace, jako je erlotinib a gefitinib. Díky tomuto duálnímu mutačnímu stavu je NCI-H820 velmi vhodným modelem pro zkoumání mechanismů rezistence a pro hodnocení inhibitorů EGFR třetí generace, jako je osimertinib, které mohou překonat rezistenci zprostředkovanou T790M.

Kromě mutací EGFR byl NCI-H820 použit ke studiu autokrinních signálních smyček a drah receptorů růstových faktorů. Výzkum prokázal, že exprimuje receptor pro inzulinu podobný růstový faktor typu I (IGF-1R), který přispívá k signalizaci přežití a proliferace. Jeho duální mutační profil a exprese receptorových tyrozinkináz z něj činí cenný nástroj v preklinických studiích zaměřených na lékovou rezistenci, strategie kombinované terapie a vývoj personalizovaných léčebných přístupů pro NSCLC s mutací EGFR.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení