NCI-H820

NCI-H820 on ihmisen ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) solulinja, joka on peräisin aikuispotilaan keuhkojen adenokarsinoomasta. Se on osa NCI:n keuhkosyöpäpaneelia, ja sitä on käytetty laajalti kohdennettujen hoitojen tutkimuksessa sen ainutlaatuisten geneettisten ominaisuuksien vuoksi. Morfologisesti soluilla on epiteeliominaisuuksia, ja ne kasvavat tarttuvina monokerroksina. Niitä viljellään tyypillisesti RPMI-1640-väliaineessa, jota on täydennetty 10 %:lla naudan sikiöseerumilla, ja niitä pidetään tavanomaisissa soluviljelyolosuhteissa (37 °C, 5 % CO₂).

Geneettisesti NCI-H820-solujen erityispiirteenä on EGFR:n eksoni 19:n deleetiomutaatio (E746-A750del), joka on yleinen aktivoiva mutaatio, joka liittyy herkkyyteen EGFR-tyrosiinikinaasin estäjille (TKI). Sillä on kuitenkin myös toissijainen EGFR T790M -mutaatio, joka on vakiintunut mekanismi, joka aiheuttaa hankittua resistenssiä ensimmäisen sukupolven TKI-lääkkeille, kuten erlotinibille ja gefitinibille. Tämä kaksoismutaatiotilanne tekee NCI-H820:sta erittäin merkityksellisen mallin resistenssimekanismien tutkimiseen ja kolmannen sukupolven EGFR:n estäjien, kuten osimertinibin, arviointiin, sillä ne voivat voittaa T790M-välitteisen resistenssin.

EGFR-mutaatioiden lisäksi NCI-H820-mallia on käytetty autokriinisten signaalisilmukoiden ja kasvutekijäreseptoreittien tutkimiseen. Tutkimukset ovat osoittaneet, että se ilmentää tyypin I insuliinin kaltaista kasvutekijäreseptoria (IGF-1R), joka edistää eloonjäämisen ja proliferaation signalointia. Sen kaksoismutaatioprofiili ja reseptorityrosiinikinaasien ilmentyminen tekevät siitä arvokkaan välineen prekliinisissä tutkimuksissa, joissa keskitytään lääkeresistenssiin, yhdistelmähoitostrategioihin ja EGFR-mutaatioita sisältävän NSCLC:n yksilöllisten hoitomenetelmien kehittämiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa