NCI-H820

NCI-H820 is een humane niet-kleincellige longkanker (NSCLC) cellijn afkomstig van een longadenocarcinoom van een volwassen patiënt. De lijn maakt deel uit van het NCI longkankerpanel en wordt vanwege zijn unieke genetische eigenschappen veel gebruikt in onderzoek naar doelgerichte therapieën. Morfologisch vertonen de cellen epitheliale kenmerken en groeien ze als hechtende monolagen. Ze worden meestal gekweekt in RPMI-1640 medium aangevuld met 10% foetaal runderserum en onderhouden onder standaard celkweekomstandigheden (37°C, 5% CO₂).

Genetisch gezien is NCI-H820 opmerkelijk vanwege de aanwezigheid van een EGFR exon 19 deletiemutatie (E746-A750del), een veel voorkomende activerende mutatie die geassocieerd wordt met gevoeligheid voor EGFR tyrosinekinaseremmers (TKI's). Het heeft echter ook een secundaire EGFR T790M mutatie, een bekend mechanisme van verworven resistentie tegen eerste generatie TKI's zoals erlotinib en gefitinib. Deze dubbele mutatiestatus maakt NCI-H820 een zeer relevant model voor het onderzoeken van resistentiemechanismen en voor het evalueren van derdegeneratie EGFR-remmers zoals osimertinib, dat T790M-gemedieerde resistentie kan overwinnen.

Naast de EGFR-mutaties is NCI-H820 gebruikt om autocriene signaleringslussen en groeifactorreceptorroutes te bestuderen. Onderzoek heeft aangetoond dat het type I insuline-achtige groeifactorreceptor (IGF-1R) tot expressie brengt, wat bijdraagt aan overlevings- en proliferatiesignalering. Het dubbele mutatieprofiel en de expressie van receptortyrosinekinasen maken het een waardevol hulpmiddel in preklinische studies gericht op geneesmiddelenresistentie, combinatietherapiestrategieën en de ontwikkeling van gepersonaliseerde behandelingsbenaderingen voor EGFR-mutant NSCLC.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring