NCI-H820

NCI-H820 to ludzka linia komórkowa niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC) pochodząca z gruczolakoraka płuc dorosłego pacjenta. Jest ona częścią panelu raka płuc NCI i była szeroko stosowana w badaniach nad terapiami celowanymi ze względu na swoje unikalne cechy genetyczne. Morfologicznie komórki wykazują cechy nabłonkowe i rosną jako przylegające monowarstwy. Zazwyczaj hodowane są w pożywce RPMI-1640 uzupełnionej 10% płodową surowicą bydlęcą i utrzymywane w standardowych warunkach hodowli komórkowej (37°C, 5% CO₂).

Pod względem genetycznym, NCI-H820 wyróżnia się mutacją delecyjną egzonu 19 EGFR (E746-A750del), powszechną mutacją aktywującą związaną z wrażliwością na inhibitory kinazy tyrozynowej EGFR (TKI). Jednak posiada również wtórną mutację EGFR T790M, która jest dobrze ugruntowanym mechanizmem nabytej oporności na TKI pierwszej generacji, takie jak erlotynib i gefitynib. Ten podwójny status mutacji sprawia, że NCI-H820 jest bardzo istotnym modelem do badania mechanizmów oporności i oceny inhibitorów EGFR trzeciej generacji, takich jak osimertinib, które mogą przezwyciężyć oporność za pośrednictwem T790M.

Oprócz mutacji EGFR, NCI-H820 został wykorzystany do badania autokrynnych pętli sygnałowych i szlaków receptora czynnika wzrostu. Badania wykazały ekspresję receptora insulinopodobnego czynnika wzrostu typu I (IGF-1R), przyczyniając się do sygnalizacji przeżycia i proliferacji. Jego podwójny profil mutacji i ekspresja receptorowych kinaz tyrozynowych sprawiają, że jest on cennym narzędziem w badaniach przedklinicznych koncentrujących się na oporności na leki, strategiach terapii skojarzonej i opracowywaniu spersonalizowanych metod leczenia NSCLC z mutacją EGFR.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym