NCI-H820

NCI-H820 ist eine menschliche Zelllinie des nicht-kleinzelligen Lungenkrebses (NSCLC), die von einem Lungenadenokarzinom eines erwachsenen Patienten stammt. Sie ist Teil des NCI-Lungenkrebs-Panels und wurde aufgrund ihrer einzigartigen genetischen Merkmale in der Forschung zu zielgerichteten Therapien weithin eingesetzt. Morphologisch weisen die Zellen epitheliale Merkmale auf und wachsen als adhärente Monolayer. Sie werden in der Regel in RPMI-1640-Medium kultiviert, das mit 10 % fötalem Rinderserum ergänzt ist, und unter Standard-Zellkulturbedingungen (37 °C, 5 % CO₂) gehalten.

Genetisch zeichnet sich NCI-H820 durch eine EGFR-Exon-19-Deletionsmutation (E746-A750del) aus, eine häufige Aktivierungsmutation, die mit einer Empfindlichkeit gegenüber EGFR-Tyrosinkinase-Inhibitoren (TKI) einhergeht. Es weist jedoch auch eine sekundäre EGFR-T790M-Mutation auf, die ein bekannter Mechanismus der erworbenen Resistenz gegen TKI der ersten Generation wie Erlotinib und Gefitinib ist. Dieser doppelte Mutationsstatus macht NCI-H820 zu einem äußerst relevanten Modell für die Untersuchung von Resistenzmechanismen und für die Bewertung von EGFR-Inhibitoren der dritten Generation wie Osimertinib, die die T790M-vermittelte Resistenz überwinden können.

Zusätzlich zu den EGFR-Mutationen wurde NCI-H820 zur Untersuchung von autokrinen Signalkreisläufen und Wachstumsfaktor-Rezeptorwegen verwendet. Die Forschung hat gezeigt, dass es den insulinähnlichen Wachstumsfaktor-Rezeptor (IGF-1R) vom Typ I exprimiert, der zur Überlebens- und Proliferations-Signalgebung beiträgt. Sein duales Mutationsprofil und die Expression von Rezeptortyrosinkinasen machen ihn zu einem wertvollen Instrument in präklinischen Studien, die sich auf Arzneimittelresistenz, Kombinationstherapiestrategien und die Entwicklung personalisierter Behandlungsansätze für EGFR-mutierten NSCLC konzentrieren.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung