NCI-H820

NCI-H820 je ľudská bunková línia nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) odvodená z adenokarcinómu pľúc dospelého pacienta. Je súčasťou panelu rakoviny pľúc NCI a vďaka svojim jedinečným genetickým vlastnostiam sa široko používa vo výskume cielených terapií. Morfologicky bunky vykazujú epitelové vlastnosti a rastú ako priliehajúce monovrstvy. Zvyčajne sa kultivujú v médiu RPMI-1640 doplnenom o 10 % fetálneho hovädzieho séra a udržiavajú sa v štandardných podmienkach bunkovej kultúry (37 °C, 5 % CO₂).

Z genetického hľadiska sa NCI-H820 vyznačuje tým, že obsahuje mutáciu delécie exónu 19 EGFR (E746-A750del), bežnú aktivačnú mutáciu spojenú s citlivosťou na inhibítory tyrozínkinázy EGFR (TKI). Má však aj sekundárnu mutáciu EGFR T790M, ktorá je dobre známym mechanizmom získanej rezistencie na TKI prvej generácie, ako sú erlotinib a gefitinib. Tento stav dvojitej mutácie robí z NCI-H820 veľmi vhodný model na skúmanie mechanizmov rezistencie a na hodnotenie inhibítorov EGFR tretej generácie, ako je osimertinib, ktoré môžu prekonať rezistenciu sprostredkovanú T790M.

Okrem mutácií EGFR sa NCI-H820 využíva na štúdium autokrinných signálnych slučiek a dráh receptorov rastových faktorov. Výskum preukázal, že exprimuje receptor pre inzulínu podobný rastový faktor typu I (IGF-1R), ktorý prispieva k signalizácii prežitia a proliferácie. Jeho duálny mutačný profil a expresia receptorových tyrozínkináz z neho robia cenný nástroj v predklinických štúdiách zameraných na rezistenciu na lieky, stratégie kombinovanej liečby a vývoj personalizovaných liečebných prístupov pre NSCLC s mutáciou EGFR.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke