NCI-H820

NCI-H820 هو خط خلوي بشري لسرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) مشتق من سرطان الرئة الغدي لمريض بالغ. وهو جزء من لوحة سرطان الرئة في المعهد القومي للسرطان وقد استُخدم على نطاق واسع في الأبحاث على العلاجات المستهدفة بسبب سماته الجينية الفريدة. من الناحية الشكلية، تُظهر الخلايا خصائص طلائية وتنمو كطبقات أحادية ملتصقة. وعادةً ما تُزرع في وسط RPMI-1640 المضاف إليه 10% مصل بقري جنيني ويُحفظ في ظروف زراعة الخلايا القياسية (37 درجة مئوية، 5% من ثاني أكسيد الكربون).

من الناحية الوراثية، يتميز NCI-H820 بحمله لطفرة حذف الفص 19 من الإكزون 19 من عامل النمو EGFR (E746-A750del)، وهي طفرة تنشيطية شائعة مرتبطة بالحساسية لمثبطات التيروزين كيناز التيروزين (TKIs). ومع ذلك، فإنه يحتوي أيضًا على طفرة ثانوية T790M في عامل النمو البشري EGFR، وهي آلية راسخة للمقاومة المكتسبة لمثبطات كيناز التيروزين كيناز من الجيل الأول مثل إرلوتينيب وجيفيتينيب. إن حالة الطفرة المزدوجة هذه تجعل من NCI-H820 نموذجًا مناسبًا للغاية للتحقيق في آليات المقاومة ولتقييم الجيل الثالث من مثبطات عامل النمو البشري لمثبطات عامل النمو البشري مثل أوسيميرتينيب، والتي يمكنها التغلب على المقاومة بوساطة T790M.

وبالإضافة إلى طفرات عامل النمو البشري EGFR، تم استخدام NCI-H820 لدراسة حلقات الإشارات الذاتية الاستقواء ومسارات مستقبلات عامل النمو. وقد أظهرت الأبحاث أنه يعبر عن مستقبلات عامل النمو الشبيه بالأنسولين من النوع الأول (IGF-1R)، مما يساهم في إشارات البقاء والانتشار. ويجعل منه ملف الطفرات المزدوجة وتعبيره عن مستقبلات التيروزين كيناز أداة قيّمة في الدراسات ما قبل السريرية التي تركز على مقاومة الأدوية واستراتيجيات العلاج المركب وتطوير أساليب علاجية مخصصة لعلاج سرطان الرئة غير صغير الخلايا غير صغير الخلايا المتحوّر من النوع EGFR.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان