NCI-H820

La NCI-H820 es una línea celular de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) humano derivada de un adenocarcinoma pulmonar de un paciente adulto. Forma parte del panel de cáncer de pulmón del NCI y se ha utilizado ampliamente en la investigación sobre terapias dirigidas debido a sus características genéticas únicas. Desde el punto de vista morfológico, las células presentan características epiteliales y crecen formando monocapas adherentes. Por lo general, se cultivan en medio RPMI-1640 suplementado con un 10 % de suero fetal bovino y se mantienen en condiciones estándar de cultivo celular (37 °C, 5 % de CO₂).

Genéticamente, la línea NCI-H820 se destaca por presentar una mutación por deleción en el exón 19 del EGFR (E746-A750del), una mutación activadora común asociada con la sensibilidad a los inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR (TKI). Sin embargo, también presenta una mutación secundaria T790M del EGFR, que constituye un mecanismo bien establecido de resistencia adquirida a los TKI de primera generación, como el erlotinib y el gefitinib. Este estado de doble mutación convierte a NCI-H820 en un modelo altamente relevante para investigar los mecanismos de resistencia y para evaluar inhibidores del EGFR de tercera generación como el osimertinib, que pueden superar la resistencia mediada por la mutación T790M.

Además de sus mutaciones del EGFR, el NCI-H820 se ha utilizado para estudiar los bucles de señalización autocrina y las vías de los receptores de factores de crecimiento. Las investigaciones han demostrado que expresa el receptor del factor de crecimiento similar a la insulina tipo I (IGF-1R), lo que contribuye a la señalización de la supervivencia y la proliferación. Su perfil de mutación dual y la expresión de receptores tirosina quinasa lo convierten en una herramienta valiosa en estudios preclínicos enfocados en la resistencia a los fármacos, las estrategias de terapia combinada y el desarrollo de enfoques de tratamiento personalizados para el CPCNP con mutación del EGFR.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.