NCI-H820

NCI-H820 är en human cellinje för icke-småcellig lungcancer (NSCLC) som härrör från ett lungadenokarcinom hos en vuxen patient. Den ingår i NCI:s lungcancerpanel och har tack vare sina unika genetiska egenskaper använts i stor utsträckning i forskning om riktade behandlingar. Morfologiskt uppvisar cellerna epiteliala egenskaper och växer som vidhäftande monolager. De odlas vanligen i RPMI-1640-medium kompletterat med 10% fetalt bovint serum och hålls under standardförhållanden för cellodling (37°C, 5% CO₂).

Genetiskt sett är NCI-H820 känd för att ha en deletionsmutation i EGFR exon 19 (E746-A750del), en vanlig aktiverande mutation som förknippas med känslighet för EGFR-tyrosinkinashämmare (TKI). Den har emellertid också en sekundär EGFR T790M-mutation, som är en väletablerad mekanism för förvärvad resistens mot första generationens TKI:er som erlotinib och gefitinib. Denna dubbla mutationsstatus gör NCI-H820 till en mycket relevant modell för att undersöka resistensmekanismer och för att utvärdera tredje generationens EGFR-hämmare som osimertinib, som kan övervinna T790M-medierad resistens.

Utöver sina EGFR-mutationer har NCI-H820 använts för att studera autokrina signaleringsslingor och tillväxtfaktorreceptorvägar. Forskning har visat att den uttrycker typ I-receptorn för insulinliknande tillväxtfaktor (IGF-1R), vilket bidrar till överlevnads- och proliferationssignalering. Dess dubbla mutationsprofil och uttryck för receptortyrosinkinaser gör den till ett värdefullt verktyg i prekliniska studier med fokus på läkemedelsresistens, strategier för kombinationsbehandling och utveckling av individanpassade behandlingsmetoder för EGFR-muterad NSCLC.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring