NCI-H820

Το NCI-H820 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) που προέρχεται από αδενοκαρκίνωμα πνεύμονα ενήλικου ασθενούς. Αποτελεί μέρος της ομάδας NCI για τον καρκίνο του πνεύμονα και έχει χρησιμοποιηθεί ευρέως στην έρευνα για στοχευμένες θεραπείες λόγω των μοναδικών γενετικών χαρακτηριστικών της. Μορφολογικά, τα κύτταρα παρουσιάζουν επιθηλιακά χαρακτηριστικά και αναπτύσσονται ως προσκολλημένες μονοστρώσεις. Τυπικά καλλιεργούνται σε μέσο RPMI-1640 συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών και διατηρούνται υπό τυπικές συνθήκες κυτταροκαλλιέργειας (37°C, 5% CO₂).

Γενετικά, το NCI-H820 είναι αξιοσημείωτο ότι φέρει μετάλλαξη διαγραφής του εξονίου 19 του EGFR (E746-A750del), μια κοινή ενεργοποιητική μετάλλαξη που σχετίζεται με ευαισθησία στους αναστολείς της κινάσης τυροσίνης EGFR (TKIs). Ωστόσο, διαθέτει επίσης μια δευτερογενή μετάλλαξη EGFR T790M, η οποία αποτελεί έναν καθιερωμένο μηχανισμό επίκτητης αντοχής σε TKIs πρώτης γενιάς, όπως η erlotinib και η gefitinib. Αυτή η κατάσταση διπλής μετάλλαξης καθιστά το NCI-H820 ένα εξαιρετικά σχετικό μοντέλο για τη διερεύνηση των μηχανισμών αντοχής και για την αξιολόγηση αναστολέων EGFR τρίτης γενιάς, όπως η οσιμερτινίμπη, η οποία μπορεί να ξεπεράσει την αντίσταση που προκαλείται από την T790M.

Εκτός από τις μεταλλάξεις του EGFR, το NCI-H820 έχει χρησιμοποιηθεί για τη μελέτη βρόχων αυτοκρινούς σηματοδότησης και μονοπατιών υποδοχέων αυξητικών παραγόντων. Η έρευνα έδειξε ότι εκφράζει τον υποδοχέα του ινσουλινόμορφου αυξητικού παράγοντα τύπου Ι (IGF-1R), συμβάλλοντας στη σηματοδότηση της επιβίωσης και του πολλαπλασιασμού. Το προφίλ διπλής μετάλλαξης και η έκφραση των κινασών τυροσίνης των υποδοχέων το καθιστούν πολύτιμο εργαλείο σε προκλινικές μελέτες που επικεντρώνονται στην αντοχή στα φάρμακα, στις στρατηγικές συνδυαστικής θεραπείας και στην ανάπτυξη εξατομικευμένων θεραπευτικών προσεγγίσεων για τον μεταλλαγμένο με EGFR NSCLC.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης