NCI-H820

NCI-H820 on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendi kopsu adenokartsinoomist. See on osa NCI kopsuvähi paneelist ja seda on tänu selle ainulaadsetele geneetilistele omadustele laialdaselt kasutatud sihtotstarbeliste ravimeetodite uurimisel. Morfoloogiliselt on rakud epiteeli omadustega ja kasvavad adherentsete monokihidena. Tavaliselt kasvatatakse neid RPMI-1640 keskkonnas, millele on lisatud 10% veise loote seerumit, ja neid hoitakse standardsetes rakukultuuritingimustes (37 °C, 5% CO₂).

Geneetiliselt on NCI-H820 märkimisväärne EGFR-i 19. eksoni deletsiooni mutatsioon (E746-A750del), mis on levinud aktiveeriv mutatsioon, mida seostatakse tundlikkusega EGFR-i türosiinkinaasi inhibiitorite (TKI) suhtes. Kuid tal on ka EGFR T790M mutatsioon, mis on hästi teadaolev mehhanism omandatud resistentsuse tekkeks esimese põlvkonna TKI-de, näiteks erlotiniibi ja gefitiniibi suhtes. Selline topeltmutatsioonistaatus muudab NCI-H820 väga asjakohaseks mudeliks resistentsusmehhanismide uurimiseks ja kolmanda põlvkonna EGFR-inhibiitorite, nagu osimertiniib, hindamiseks, mis võivad ületada T790M-vahendatud resistentsuse.

Lisaks EGFR-mutatsioonidele on NCI-H820't kasutatud ka autokriinsete signalisatsiooniringide ja kasvufaktoriretseptorite radade uurimiseks. Uuringud on näidanud, et ta ekspresseerib I tüüpi insuliinilaadse kasvufaktori retseptorit (IGF-1R), mis aitab kaasa ellujäämise ja proliferatsiooni signalisatsioonile. Tema topeltmutatsiooniprofiil ja retseptori türosiinkinaaside ekspressioon teevad sellest väärtusliku vahendi prekliinilistes uuringutes, mis keskenduvad ravimresistentsusele, kombinatsiooniteraapia strateegiatele ja EGFR-mutantidega NSCLC personaliseeritud ravimeetodite väljatöötamisele.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest