NCI-H820

A NCI-H820 é uma linha celular humana de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) derivada de um adenocarcinoma do pulmão de um doente adulto. Faz parte do painel de cancro do pulmão do NCI e tem sido amplamente utilizada na investigação de terapias orientadas devido às suas caraterísticas genéticas únicas. Morfologicamente, as células apresentam caraterísticas epiteliais e crescem em monocamadas aderentes. São normalmente cultivadas em meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino e mantidas em condições normais de cultura de células (37°C, 5% CO₂).

Do ponto de vista genético, o NCI-H820 é notável por albergar uma mutação de supressão do exão 19 do EGFR (E746-A750del), uma mutação de ativação comum associada à sensibilidade aos inibidores da tirosina quinase do EGFR (TKIs). No entanto, também possui uma mutação secundária EGFR T790M, que é um mecanismo bem estabelecido de resistência adquirida aos TKIs de primeira geração, como o erlotinib e o gefitinib. Este estatuto de dupla mutação torna o NCI-H820 um modelo altamente relevante para a investigação dos mecanismos de resistência e para a avaliação dos inibidores do EGFR de terceira geração, como o osimertinib, que pode ultrapassar a resistência mediada pela mutação T790M.

Para além das suas mutações EGFR, o NCI-H820 tem sido utilizado para estudar os circuitos de sinalização autócrina e as vias dos receptores de factores de crescimento. A investigação demonstrou que expressa o recetor do fator de crescimento semelhante à insulina tipo I (IGF-1R), contribuindo para a sinalização da sobrevivência e da proliferação. O seu perfil de mutação dupla e a expressão de receptores tirosina-quinases fazem dele uma ferramenta valiosa em estudos pré-clínicos centrados na resistência aos medicamentos, estratégias de terapia combinada e desenvolvimento de abordagens de tratamento personalizadas para o NSCLC com mutação EGFR.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia