RAW 264.7-GFP

Les cellules RAW 264.7-GFP sont un dérivé génétiquement modifié de la lignée cellulaire murine RAW 264.7 de type macrophage, issue d’une tumeur de souris adulte de la lignée des monocytes/macrophages. Ces cellules ont été modifiées pour exprimer la protéine fluorescente verte (GFP), ce qui permet la visualisation en temps réel de processus cellulaires tels que la morphologie, la migration et l’activité phagocytaire sous microscope à fluorescence. La lignée parentale RAW 264.7 est largement utilisée comme modèle pour les réponses immunitaires innées, car elle conserve de nombreuses caractéristiques fonctionnelles des macrophages activés, notamment la capacité de produire des cytokines, de l’oxyde nitrique et des espèces réactives de l’oxygène lorsqu’elle est stimulée.

L’incorporation de la GFP permet un suivi dynamique et non invasif du comportement des macrophages in vitro, ce qui rend les cellules RAW 264.7-GFP particulièrement utiles pour les études d’imagerie de cellules vivantes et les applications de criblage à haut contenu. Ces cellules réagissent fortement aux stimuli pro-inflammatoires tels que le lipopolysaccharide (LPS) et l’interféron gamma, ce qui entraîne l’activation de voies de signalisation, notamment celles de NF-κB et de MAPK. Cela en fait un modèle utile pour étudier la signalisation inflammatoire, les interactions hôte-pathogène et les effets des agents pharmacologiques sur l’activation des macrophages. Toutefois, comme pour la lignée parentale, les chercheurs doivent tenir compte du fait que les modèles dérivés de RAW 264.7 peuvent présenter des voies de régulation altérées par rapport aux macrophages primaires.

Modification génétique : Modifiés de façon stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1; maintenus sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1–5 µg/mL). Confinement S1/BSL-1.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.