RAW 264.7-GFP

Celice RAW 264.7-GFP so genetsko spremenjena različica mišje celične linije RAW 264.7, podobne makrofagom, ki izvira iz tumorja odrasle miši iz linije monocitov/makrofagov. Te celice so bile genetsko spremenjene tako, da izražajo zeleni fluorescenčni protein (GFP), kar omogoča vizualizacijo celičnih procesov, kot so morfologija, migracija in fagocitna aktivnost, v realnem času pod fluorescenčnim mikroskopom. Izvorna linija RAW 264.7 se pogosto uporablja kot model za prirojene imunski odzive, saj ohranja številne funkcionalne značilnosti aktiviranih makrofagov, vključno z zmožnostjo, da ob stimulaciji proizvajajo citokine, dušikov oksid in reaktivne oblike kisika.

Vgradnja GFP omogoča dinamično, neinvazivno spremljanje vedenja makrofagov in vitro, zaradi česar so celice RAW 264.7-GFP še posebej dragocene za študije slikanja živih celic in aplikacije presejanja z visoko vsebnostjo. Te celice se močno odzivajo na pro-vnetne dražljaje, kot sta lipopolisaharid (LPS) in interferon-gama, kar vodi do aktivacije signalnih poti, vključno z NF-κB in MAPK. Zaradi tega so uporaben model za preučevanje vnetnih signalov, interakcij med gostiteljem in patogenom ter učinkov farmakoloških sredstev na aktivacijo makrofagov. Vendar pa morajo raziskovalci, tako kot pri izvorni liniji, upoštevati, da lahko modeli, izpeljani iz linije RAW 264.7, v primerjavi s primarnimi makrofagi kažejo spremenjene regulativne poti.

Genetska modifikacija: Stabilno modificirani z replikacijsko nesposobno lentiviralno transdukcijo za izražanje poročevalca zelenega fluorescenčnega proteina ZsGreen1; gojeni kot poliklonalna populacija pod selekcijo s puromicinom (1–5 µg/mL). Varnostna stopnja S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo