RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP-celler er en genetisk modifisert variant av den muselignende makrofagcellelinjen RAW 264.7, som stammer fra en svulst hos en voksen mus av monocyt-/makrofag-stamme. Disse cellene er blitt manipulert til å uttrykke grønt fluorescerende protein (GFP), noe som muliggjør visualisering i sanntid av cellulære prosesser som morfologi, migrasjon og fagocytisk aktivitet under fluorescensmikroskopi. Den opprinnelige RAW 264.7-linjen er mye brukt som modell for medfødte immunresponser, da den beholder mange funksjonelle egenskaper hos aktiverte makrofager, inkludert evnen til å produsere cytokiner, nitrogenoksid og reaktive oksygenarter ved stimulering.

Inkorporeringen av GFP muliggjør dynamisk, ikke-invasiv overvåking av makrofagenes atferd in vitro, noe som gjør RAW 264.7-GFP-celler spesielt verdifulle for avbildningsstudier av levende celler og anvendelser innen høyinnholds-screening. Disse cellene reagerer kraftig på proinflammatoriske stimuli som lipopolysakkarid (LPS) og interferon-gamma, noe som fører til aktivering av signalveier, inkludert NF-κB og MAPK. Dette gjør dem til en nyttig modell for å undersøke inflammatorisk signalering, interaksjoner mellom vert og patogen og effekten av farmakologiske midler på makrofagaktivering. Imidlertid bør forskere, i likhet med stamlinjen, ta hensyn til at modeller avledet fra RAW 264.7 kan vise endrede reguleringsveier sammenlignet med primære makrofager.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke det grønne fluorescerende proteinreporteren ZsGreen1; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-sikkerhetsnivå.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring