RAW 264.7-GFP

תאי RAW 264.7-GFP הם נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים הדמוי-מקרופאג RAW 264.7 של עכברים, שמקורו בגידול של עכבר בוגר ממשפחת המונוציטים/מקרופאגים. תאים אלה הונדסו כך שיבטאו חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP), מה שמאפשר הדמיה בזמן אמת של תהליכים תאיים כגון מורפולוגיה, נדידה ופעילות פגוציטית תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי. קו האבות RAW 264.7 נמצא בשימוש נרחב כמודל לתגובות חיסוניות מולדות, שכן הוא שומר על מאפיינים תפקודיים רבים של מקרופאגים מופעלים, כולל היכולת לייצר ציטוקינים, תחמוצת חנקן ומינים חמצן תגובתיים בעקבות גירוי.

שילוב ה-GFP מאפשר ניטור דינמי ולא פולשני של התנהגות המקרופאגים במבחנה, מה שהופך את תאי RAW 264.7-GFP לבעלי ערך רב במיוחד למחקרי הדמיה של תאים חיים וליישומי סינון בעלי תוכן גבוה. תאים אלה מגיבים בעוצמה לגירויים פרו-דלקתיים כגון ליפופוליסכריד (LPS) ואינטרפרון-גאמא, מה שמוביל להפעלת מסלולי איתות, כולל NF-κB ו-MAPK. דבר זה הופך אותם למודל שימושי לחקר איתות דלקתי, אינטראקציות בין מארח לפתוגן והשפעות של חומרים פרמקולוגיים על הפעלת מקרופאגים. עם זאת, בדומה לקו ההורי, על החוקרים לקחת בחשבון כי מודלים הנגזרים מ-RAW 264.7 עשויים להפגין מסלולי ויסות שונים בהשוואה למקרופאגים ראשוניים.

שינוי גנטי: שונו באופן יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; מוחזקים כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה של פו-רומיצין (1–5 µg/mL). רמת אבטחה S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו