RAW 264.7-GFP

تُعد خلايا RAW 264.7-GFP مشتقًا مُعدَّلًا وراثيًّا من سلالة الخلايا الفئوية الشبيهة بالبلاعم RAW 264.7، والتي تنشأ من ورم في فأر بالغ ينتمي إلى سلالة الخلايا الأحادية/البلاعم. وقد تم هندسة هذه الخلايا لتعبّر عن البروتين الفلوري الأخضر (GFP)، مما يتيح التصوير في الوقت الحقيقي للعمليات الخلوية مثل الشكل المورفولوجي، والهجرة، والنشاط البلعومي تحت المجهر الفلوري. يُستخدم خط RAW 264.7 الأصلي على نطاق واسع كنموذج للاستجابات المناعية الفطرية، حيث يحتفظ بالعديد من الخصائص الوظيفية للخلايا البلعمية المنشطة، بما في ذلك القدرة على إنتاج السيتوكينات وأكسيد النيتريك وأنواع الأكسجين التفاعلية عند التحفيز.

يتيح دمج البروتين GFP المراقبة الديناميكية وغير الغازية لسلوك البلاعم في المختبر، مما يجعل خلايا RAW 264.7-GFP ذات قيمة خاصة لدراسات تصوير الخلايا الحية وتطبيقات الفرز عالي المحتوى. تستجيب هذه الخلايا بقوة للمحفزات المؤدية للالتهاب مثل الليبوبوليسكاريد (LPS) والإنترفيرون-جاما، مما يؤدي إلى تنشيط مسارات الإشارة بما في ذلك NF-κB و MAPK. وهذا يجعلها نموذجًا مفيدًا لدراسة الإشارات الالتهابية، والتفاعلات بين المضيف والممرض، وتأثيرات العوامل الدوائية على تنشيط الخلايا البلعمية. ومع ذلك، وكما هو الحال مع السلالة الأصلية، يجب على الباحثين مراعاة أن النماذج المشتقة من RAW 264.7 قد تُظهر مسارات تنظيمية متغيرة مقارنةً بالخلايا البلعمية الأولية.

التعديل الجيني: تم تعديلها بشكل مستقر عن طريق نقل فيروسي لينتيفي غير قادر على التكاثر للتعبير عن بروتين الفلورسنت الأخضر ZsGreen1 كمؤشر؛ ويتم الحفاظ عليها كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان