RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP-solut ovat geneettisesti muunnettu johdannainen hiiren RAW 264.7 -makrofagien kaltaisesta solulinjasta, joka on peräisin aikuisen hiiren monosyytti-/makrofagisukuisesta kasvaimesta. Nämä solut on muokattu ilmentämään vihreää fluoresoivaa proteiinia (GFP), mikä mahdollistaa solujen prosessien, kuten morfologian, migraation ja fagosyyttisen aktiivisuuden, reaaliaikaisen visualisoinnin fluoresenssimikroskoopilla. Alkuperäistä RAW 264.7 -solulinjaa käytetään laajalti luontaisen immuunivasteen mallina, sillä se säilyttää monia aktivoituneiden makrofagien toiminnallisia ominaisuuksia, mukaan lukien kyvyn tuottaa sytokiineja, typpioksidia ja reaktiivisia happiyhdisteitä stimulaation seurauksena.

GFP:n sisällyttäminen mahdollistaa makrofagien käyttäytymisen dynaamisen, ei-invasiivisen seurannan in vitro, mikä tekee RAW 264.7-GFP-soluista erityisen arvokkaita elävien solujen kuvantamistutkimuksissa ja korkean sisällön seulontasovelluksissa. Nämä solut reagoivat voimakkaasti tulehdusta edistäviin ärsykkeisiin, kuten lipopolysakkaridiin (LPS) ja interferoni-gammaan, mikä johtaa signaalireittien, kuten NF-κB:n ja MAPK:n, aktivoitumiseen. Tämä tekee niistä hyödyllisen mallin tulehdussignaloinnin, isäntä-patogeenivuorovaikutusten sekä farmakologisten aineiden vaikutusten tutkimiseen makrofagien aktivoitumisessa. Kuten emolinjan kohdalla, tutkijoiden tulisi kuitenkin ottaa huomioon, että RAW 264.7 -solusta johdetuissa malleissa säätelyreitit voivat poiketa primaarimakrofagien säätelyreiteistä.

Geneettinen muuntelu: Vakaisesti muunnettu replikaatiokyvyttömällä lentiviruksen välityksellä ilmentämään ZsGreen1-vihreää fluoresoivaa proteiinireportteria; ylläpidetään polyklonaalisena populaationa puromysiiniselektiossa (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-turvaluokitus.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa