RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP ląstelės yra genetiškai modifikuotas pelių RAW 264.7 makrofagų tipo ląstelių linijos variantas, kilęs iš suaugusios pelės naviko, priklausančio monocitų/makrofagų linijai. Šios ląstelės buvo modifikuotos taip, kad ekspresuotų žalią fluorescuojantį baltymą (GFP), o tai leidžia realiuoju laiku stebėti ląstelių procesus, pavyzdžiui, morfologiją, migraciją ir fagocitinę veiklą, naudojant fluorescencinę mikroskopiją. Pirminė RAW 264.7 linija plačiai naudojama kaip įgimtų imuninių reakcijų modelis, nes ji išlaiko daugelį aktyvuotų makrofagų funkcinių savybių, įskaitant gebėjimą stimuliuojant gaminti citokinus, azoto oksidą ir reaktyviąsias deguonies rūšis.

GFP įterpimas leidžia dinamiškai ir neinvaziniu būdu stebėti makrofagų elgseną in vitro, todėl RAW 264.7-GFP ląstelės yra ypač vertingos gyvų ląstelių vaizdinimo tyrimams ir didelio turinio atrankos taikymams. Šios ląstelės stipriai reaguoja į prouždegiminius dirgiklius, pvz., lipopolisacharidą (LPS) ir interferoną-gama, o tai sukelia signalinių kelių, įskaitant NF-κB ir MAPK, aktyvaciją. Dėl to jos yra naudingas modelis uždegiminių signalų, šeimininko ir patogeno sąveikų bei farmakologinių medžiagų poveikio makrofagų aktyvacijai tyrimams. Tačiau, kaip ir tėvinės linijos atveju, tyrėjai turėtų atsižvelgti į tai, kad iš RAW 264.7 išvesti modeliai, palyginti su pirminiais makrofagais, gali pasižymėti pakitusiais reguliavimo keliais.

Genetinė modifikacija: stabiliai modifikuota replikacijos nesugebančiu lentivirusiniu transdukavimu, kad ekspresuotų žalią fluorescuojančio baltymo reporterį „ZsGreen1“; išlaikoma kaip polikloninė populiacija, atrinkta puromicino atrankos būdu (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 saugumo lygis.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime