RAW 264.7-GFP

A RAW 264.7-GFP sejtek az egér RAW 264.7 makrofágszerű sejtvonal genetikailag módosított származékai, amelyek egy felnőtt egér monocita/makrofág vonalú daganatából származnak. Ezeket a sejteket úgy alakították ki, hogy zöld fluoreszcens fehérjét (GFP) fejezzenek ki, ami lehetővé teszi a sejtes folyamatok – például a morfológia, a migráció és a fagocitikus aktivitás – valós idejű megfigyelését fluoreszcens mikroszkóp alatt. Az eredeti RAW 264.7 vonalat széles körben használják a veleszületett immunválaszok modelljeként, mivel megőrzi az aktivált makrofágok számos funkcionális jellemzőjét, beleértve azt a képességét is, hogy stimuláció hatására citokineket, nitrogén-monoxidot és reaktív oxigénfajokat termeljen.

A GFP beépítése lehetővé teszi a makrofágok viselkedésének dinamikus, nem invazív in vitro megfigyelését, ami a RAW 264.7-GFP sejteket különösen értékessé teszi élősejt-képalkotási vizsgálatokhoz és nagy tartalmú szűrési alkalmazásokhoz. Ezek a sejtek erőteljesen reagálnak olyan proinflammatorikus ingerekre, mint a lipopoliszacharid (LPS) és az interferon-gamma, ami az NF-κB és a MAPK jelátviteli útvonalak aktiválódásához vezet. Ezért hasznos modellek a gyulladásos jelátvitel, a gazda-kórokozó kölcsönhatások, valamint a farmakológiai szerek makrofágaktivációra gyakorolt hatásainak vizsgálatához. Ugyanakkor, akárcsak az anyavonal esetében, a kutatóknak figyelembe kell venniük, hogy a RAW 264.7-ből származó modellek szabályozó útvonalai eltérhetnek az elsődleges makrofágokétól.

Genetikai módosítás: Replikációra képtelen lentivirális transzdukcióval stabilan módosítva a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérje-riporter expressziójára; puromicin-szelekció (1–5 µg/mL) alatt poliklonális populációként tartva. S1/BSL-1 biztonsági besorolás.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban