RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP šūnas ir ģenētiski modificēts atvasinājums no peles makrofāgu tipa šūnu līnijas RAW 264.7, kuras izcelsme ir pieaugušas peles monocītu/makrofāgu cilmes audzējā. Šīs šūnas ir ģenētiski modificētas, lai ekspresētu zaļo fluorescējošo proteīnu (GFP), kas ļauj reāllaikā novērot šūnu procesus, piemēram, morfoloģiju, migrāciju un fagocitāro aktivitāti, izmantojot fluorescences mikroskopiju. Sākotnējā RAW 264.7 līnija tiek plaši izmantota kā iedzimto imūnreakciju modelis, jo tā saglabā daudzas aktivētu makrofāgu funkcionālās īpašības, tostarp spēju stimulācijas rezultātā ražot citokīnus, slāpekļa oksīdu un reaktīvās skābekļa formas.

GFP iekļaušana ļauj dinamiski un neinvazīvi novērot makrofāgu uzvedību in vitro, padarot RAW 264.7-GFP šūnas īpaši vērtīgas dzīvo šūnu attēlveidošanas pētījumiem un augstas izšķirtspējas skrīninga lietojumiem. Šīs šūnas spēcīgi reaģē uz proinflamatoriskiem stimuliem, piemēram, lipopolisaharīdu (LPS) un interferonu-gamma, kas izraisa signālceļu, tostarp NF-κB un MAPK, aktivāciju. Tas padara tās par noderīgu modeli iekaisuma signālu, saimnieka un patogēna mijiedarbības, kā arī farmakoloģisko līdzekļu ietekmes uz makrofāgu aktivāciju izpētei. Tomēr, tāpat kā attiecībā uz sākotnējo līniju, pētniekiem jāņem vērā, ka no RAW 264.7 atvasinātajiem modeļiem var būt mainīti regulējošie ceļi salīdzinājumā ar primārajiem makrofāgiem.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificēti, izmantojot replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļās fluorescences proteīna reporteru; tiek uzturēti kā poliklonāla populācija, izmantojot puromicīna selekciju (1–5 µg/ml). S1/BSL-1 drošības līmenis.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu