RAW 264.7-GFP

Клетките RAW 264.7-GFP са генетично модифициран вариант на мишия макрофагоподобен клетъчен линия RAW 264.7, която произхожда от тумор на възрастна мишка от линията на моноцитите/макрофагите. Тези клетки са генетично модифицирани да експресират зелен флуоресцентен протеин (GFP), което позволява визуализация в реално време на клетъчни процеси като морфология, миграция и фагоцитна активност под флуоресцентен микроскоп. Родителската линия RAW 264.7 се използва широко като модел за вродени имунни реакции, тъй като запазва много функционални характеристики на активираните макрофаги, включително способността да произвеждат цитокини, азотен оксид и реактивни кислородни видове при стимулация.

Вграждането на GFP позволява динамично, неинвазивно наблюдение на поведението на макрофагите in vitro, което прави клетките RAW 264.7-GFP особено ценни за изследвания с визуализация на живи клетки и приложения за скрининг с високо съдържание. Тези клетки реагират силно на провъзпалителни стимули като липополизахарид (LPS) и интерферон-гама, което води до активиране на сигнални пътища, включително NF-κB и MAPK. Това ги превръща в полезен модел за изследване на възпалителната сигнализация, взаимодействията между гостоприемник и патоген, както и ефектите на фармакологичните средства върху активирането на макрофагите. Въпреки това, както и при родителската линия, изследователите трябва да имат предвид, че моделите, произхождащи от RAW 264.7, могат да проявяват променени регулаторни пътища в сравнение с първичните макрофаги.

Генетична модификация: Стабилно модифицирани чрез репликационно-некомпетентна лентивирусна трансдукция за експресия на репортера ZsGreen1 – зелен флуоресцентен протеин; поддържат се като поликлонална популация при селекция с пуромицин (1–5 µg/mL). Ниво на биологична безопасност S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация