RAW 264.7-GFP

As células RAW 264.7-GFP são um derivado geneticamente modificado da linha celular murina RAW 264.7, semelhante a macrófagos, que tem origem num tumor de um rato adulto da linhagem dos monócitos/macrófagos. Estas células foram geneticamente modificadas para expressarem a proteína fluorescente verde (GFP), permitindo a visualização em tempo real de processos celulares, tais como a morfologia, a migração e a atividade fagocítica, sob microscopia de fluorescência. A linha parental RAW 264.7 é amplamente utilizada como modelo para respostas imunitárias inatas, uma vez que conserva muitas características funcionais dos macrófagos ativados, incluindo a capacidade de produzir citocinas, óxido nítrico e espécies reativas de oxigénio após estimulação.

A incorporação da GFP permite a monitorização dinâmica e não invasiva do comportamento dos macrófagos in vitro, tornando as células RAW 264.7-GFP particularmente valiosas para estudos de imagiologia de células vivas e aplicações de triagem de alto conteúdo. Estas células respondem de forma robusta a estímulos pró-inflamatórios, tais como o lipopolissacarídeo (LPS) e o interferão-gama, o que conduz à ativação de vias de sinalização, incluindo o NF-κB e a MAPK. Isto torna-as um modelo útil para investigar a sinalização inflamatória, as interações hospedeiro-patógeno e os efeitos de agentes farmacológicos na ativação dos macrófagos. No entanto, tal como acontece com a linha parental, os investigadores devem ter em conta que os modelos derivados das células RAW 264.7 podem apresentar vias reguladoras alteradas em comparação com os macrófagos primários.

Modificação genética: Modificados de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, de modo a expressarem o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidos como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Nível de contenção S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia