Skip to content
RAW 264.7-GFP
Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนู
Synonyms
GFP/RAW264.7

Documents

RAW 264.7-GFP

Cell line · Product number 305699

RAW 264.7-GFP cells are a genetically modified derivative of the murine RAW 264.7 macrophage-like cell line, which originates from an adult mouse tumor of...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ RAW 264.7-GFP เป็นเซลล์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมจากสายเซลล์ RAW 264.7 ของหนู ซึ่งคล้ายกับเซลล์มาโครฟาจ และมีต้นกำเนิดจากก้อนมะเร็งของหนูผู้ใหญ่ในสายเซลล์โมโนไซต์/มาโครฟาจ เซลล์เหล่านี้ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมให้แสดงโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) ซึ่งช่วยให้สามารถสังเกตกระบวนการภายในเซลล์ เช่น รูปร่าง การเคลื่อนที่ และกิจกรรมฟาโกไซโทซิส ได้แบบเรียลไทม์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ สายเซลล์ RAW 264.7 ต้นแบบถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองสำหรับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันแบบธรรมชาติ เนื่องจากมันยังคงรักษาลักษณะการทำงานหลายประการของมาโครฟาจที่ถูกกระตุ้นไว้ รวมถึงความสามารถในการผลิตไซโตไคน์ ออกไซด์ไนตริก และสารออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาสูงเมื่อได้รับการกระตุ้น

การรวม GFP เข้าไปช่วยให้สามารถติดตามพฤติกรรมของมาโครฟาจในหลอดทดลองได้อย่างไดนามิกและไม่รุกล้ำ ทำให้เซลล์ RAW 264.7-GFP มีคุณค่าเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาภาพเซลล์สดและการคัดกรองแบบเนื้อหาสูง เซลล์เหล่านี้ตอบสนองอย่างรุนแรงต่อสิ่งกระตุ้นที่ก่อให้เกิดการอักเสบ เช่น ลิโพโพลีแซคคาไรด์ (LPS) และอินเตอร์เฟอรอน-แกมมา ซึ่งนำไปสู่การกระตุ้นเส้นทางสัญญาณต่าง ๆ รวมถึง NF-κB และ MAPK สิ่งนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาสัญญาณการอักเสบ การปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค และผลกระทบของสารเภสัชวิทยาต่อการกระตุ้นมาโครฟาจ อย่างไรก็ตาม เช่นเดียวกับสายพันธุ์ต้นแบบ นักวิจัยควรพิจารณาว่าแบบจำลองที่พัฒนาจาก RAW 264.7 อาจแสดงเส้นทางควบคุมที่เปลี่ยนแปลงไปเมื่อเทียบกับมาโครฟาจปฐมภูมิ

การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ได้รับการดัดแปลงอย่างเสถียรผ่านกระบวนการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงโปรตีนรายงานแสงสีเขียว ZsGreen1; รักษาไว้ในฐานะประชากรโพลีโคลนัลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL) ระดับความปลอดภัย S1/BSL-1

Tissue
น้ำในช่องท้อง
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนู
Synonyms
  • GFP/RAW264.7

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Identifiers

Citation
RAW 264.7-GFP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305699)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_D7C8

04Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1 (โปรตีนเรืองแสงสีเขียว)

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Seeding density
2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Quality control and cryopreservation

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Donor age
ผู้ใหญ่