RAW 264.7-GFP
Cell line · Product number 305699
RAW 264.7-GFP cells are a genetically modified derivative of the murine RAW 264.7 macrophage-like cell line, which originates from an adult mouse tumor of...
Customization / Recommendations
- RAW 264.7-GFPCell line€800.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
เซลล์ RAW 264.7-GFP เป็นเซลล์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมจากสายเซลล์ RAW 264.7 ของหนู ซึ่งคล้ายกับเซลล์มาโครฟาจ และมีต้นกำเนิดจากก้อนมะเร็งของหนูผู้ใหญ่ในสายเซลล์โมโนไซต์/มาโครฟาจ เซลล์เหล่านี้ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมให้แสดงโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) ซึ่งช่วยให้สามารถสังเกตกระบวนการภายในเซลล์ เช่น รูปร่าง การเคลื่อนที่ และกิจกรรมฟาโกไซโทซิส ได้แบบเรียลไทม์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ สายเซลล์ RAW 264.7 ต้นแบบถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองสำหรับปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันแบบธรรมชาติ เนื่องจากมันยังคงรักษาลักษณะการทำงานหลายประการของมาโครฟาจที่ถูกกระตุ้นไว้ รวมถึงความสามารถในการผลิตไซโตไคน์ ออกไซด์ไนตริก และสารออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาสูงเมื่อได้รับการกระตุ้น
การรวม GFP เข้าไปช่วยให้สามารถติดตามพฤติกรรมของมาโครฟาจในหลอดทดลองได้อย่างไดนามิกและไม่รุกล้ำ ทำให้เซลล์ RAW 264.7-GFP มีคุณค่าเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาภาพเซลล์สดและการคัดกรองแบบเนื้อหาสูง เซลล์เหล่านี้ตอบสนองอย่างรุนแรงต่อสิ่งกระตุ้นที่ก่อให้เกิดการอักเสบ เช่น ลิโพโพลีแซคคาไรด์ (LPS) และอินเตอร์เฟอรอน-แกมมา ซึ่งนำไปสู่การกระตุ้นเส้นทางสัญญาณต่าง ๆ รวมถึง NF-κB และ MAPK สิ่งนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาสัญญาณการอักเสบ การปฏิสัมพันธ์ระหว่างโฮสต์กับเชื้อโรค และผลกระทบของสารเภสัชวิทยาต่อการกระตุ้นมาโครฟาจ อย่างไรก็ตาม เช่นเดียวกับสายพันธุ์ต้นแบบ นักวิจัยควรพิจารณาว่าแบบจำลองที่พัฒนาจาก RAW 264.7 อาจแสดงเส้นทางควบคุมที่เปลี่ยนแปลงไปเมื่อเทียบกับมาโครฟาจปฐมภูมิ
การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ได้รับการดัดแปลงอย่างเสถียรผ่านกระบวนการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงโปรตีนรายงานแสงสีเขียว ZsGreen1; รักษาไว้ในฐานะประชากรโพลีโคลนัลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL) ระดับความปลอดภัย S1/BSL-1
- Tissue
- น้ำในช่องท้อง
- Disease
- มะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนู
- Synonyms
- GFP/RAW264.7
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Identifiers
- Citation
- RAW 264.7-GFP (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305699)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_D7C8
04Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1 (โปรตีนเรืองแสงสีเขียว)
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Dissociation reagent
- แอคคูเทส
- Seeding density
- 2 ถึง 5 x 104 เซลล์/ซม.
- Fluid renewal
- 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
07Donor
- Donor age
- ผู้ใหญ่
08Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
