RAW 264.7-GFP
Cell line · Product number 305699
RAW 264.7-GFP cells are a genetically modified derivative of the murine RAW 264.7 macrophage-like cell line, which originates from an adult mouse tumor of...
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01General information
- Description
RAW 264.7-GFP 細胞是小鼠 RAW 264.7 巨噬細胞樣細胞系的基因改造衍生物,其源自成年小鼠單核細胞/巨噬細胞系系的腫瘤。 這些細胞經過基因工程改造,可表達綠色螢光蛋白(GFP),從而能在螢光顯微鏡下即時觀察細胞形態、遷移及吞噬活性等細胞過程。 其親本 RAW 264.7 細胞系廣泛用作先天免疫反應的模型,因為它保留了活化巨噬細胞的許多功能特徵,包括在受到刺激時產生細胞因子、一氧化氮和活性氧的能力。
透過整合 GFP,可對體外巨噬細胞的行為進行動態、非侵入性的監測,使 RAW 264.7-GFP 細胞在活細胞成像研究及高內容篩選應用中具有特別重要的價值。 這些細胞對脂多醣(LPS)和干擾素-γ 等促炎性刺激有強烈的反應,從而激活包括 NF-κB 和 MAPK 在內的訊號傳導途徑。這使它們成為研究炎症訊號傳導、宿主-病原體相互作用以及藥理學製劑對巨噬細胞活化的影響的有用模型。 然而,與親本細胞系相同,研究人員應留意,相較於原代巨噬細胞,RAW 264.7 衍生的模型可能在調節路徑上有所改變。
基因改造:透過複製無能的慢病毒轉導進行穩定改造,以表達 ZsGreen1 綠色螢光蛋白報告基因;在嘌呤黴素(1–5 µg/mL)篩選下維持為多克隆細胞群。S1/BSL-1 防護等級。
- Tissue
- 腹水
- Disease
- 小鼠白血病
- Synonyms
- GFP/RAW264.7
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 2
03Identifiers
- Citation
- RAW 264.7-GFP(Cytion 型號 305699)
- NCBI TaxID
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_D7C8
04Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1(綠色螢光蛋白)
05Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640,含 2.0 mM 穩定谷氨醯胺,含 2.0 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Seeding density
- 2 至 5 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Fluid renewal
- 每週 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
06Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Donor age
- 成人
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
