RAW 264.7-GFP

Komórki RAW 264.7-GFP stanowią genetycznie zmodyfikowaną odmianę mysiej linii komórkowej RAW 264.7 o charakterze podobnym do makrofagów, wywodzącej się z guza dorosłej myszy należącego do linii monocytów/makrofagów. Komórki te zostały zmodyfikowane genetycznie w celu ekspresji zielonego białka fluorescencyjnego (GFP), co umożliwia wizualizację w czasie rzeczywistym procesów komórkowych, takich jak morfologia, migracja i aktywność fagocytarna, pod mikroskopem fluorescencyjnym. Macierzysta linia RAW 264.7 jest szeroko stosowana jako model odpowiedzi immunologicznej wrodzonej, ponieważ zachowuje wiele cech funkcjonalnych aktywowanych makrofagów, w tym zdolność do wytwarzania cytokin, tlenku azotu i reaktywnych form tlenu po stymulacji.

Wprowadzenie GFP pozwala na dynamiczne, nieinwazyjne monitorowanie zachowania makrofagów in vitro, co sprawia, że komórki RAW 264.7-GFP są szczególnie cenne w badaniach obrazowania żywych komórek oraz w zastosowaniach związanych z przesiewaniem o wysokiej zawartości. Komórki te silnie reagują na bodźce prozapalne, takie jak lipopolisacharyd (LPS) i interferon gamma, co prowadzi do aktywacji szlaków sygnałowych, w tym NF-κB i MAPK. To sprawia, że są one użytecznym modelem do badania sygnalizacji zapalnej, interakcji między gospodarzem a patogenem oraz wpływu środków farmakologicznych na aktywację makrofagów. Jednak, podobnie jak w przypadku linii macierzystej, badacze powinni wziąć pod uwagę, że modele pochodzące z linii RAW 264.7 mogą wykazywać zmienione szlaki regulacyjne w porównaniu z pierwotnymi makrofagami.

Modyfikacja genetyczna: Stabilnie zmodyfikowane poprzez transdukcję lentiwirusową bez zdolności do replikacji w celu ekspresji reporterowego białka fluorescencyjnego ZsGreen1; utrzymywane jako populacja poliklonalna pod selekcją puromycyną (1–5 µg/ml). Poziom bezpieczeństwa S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym