RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP rakud on hiire makrofaagilaadse rakuliini RAW 264.7 geneetiliselt muundatud derivaat, mis pärineb täiskasvanud hiire monotsüütide/makrofaagide liini kuuluvast kasvajast. Need rakud on geneetiliselt muundatud nii, et need ekspresseeriksid rohelist fluorestsentsvalku (GFP), mis võimaldab fluorestsentsmikroskoobi abil reaalajas jälgida rakulisi protsesse, nagu morfoloogia, migratsioon ja fagotsüütiline aktiivsus. Algrida RAW 264.7 kasutatakse laialdaselt kaasasündinud immuunvastuse mudelina, kuna see säilitab paljud aktiveeritud makrofaagide funktsionaalsed omadused, sealhulgas võime stimuleerimisel toota tsütokiine, lämmastikoksiidi ja reaktiivseid hapniku liike.

GFP-i lisamine võimaldab makrofaagide käitumise dünaamilist ja mitteinvasiivset jälgimist in vitro, mistõttu on RAW 264.7-GFP-rakud eriti väärtuslikud elusrakkude pildistamise uuringutes ja suure infosisaldusega sõelumisrakendustes. Need rakud reageerivad tugevalt proinflammatoorsetele stiimulitele, nagu lipopolüsahhariid (LPS) ja interferoon-gamma, mis viib signaaliteede, sealhulgas NF-κB ja MAPK, aktiveerumiseni. See teeb neist kasuliku mudeli põletikuliste signaalide, peremees-patogeeni vastasmõjude ning farmakoloogiliste ainete mõju uurimiseks makrofaagide aktiveerumisele. Siiski, nagu ka emaliini puhul, peaksid teadlased arvestama, et RAW 264.7-st tuletatud mudelitel võivad esineda muutunud regulatsiooniteed võrreldes primaarsete makrofaagidega.

Geneetiline modifitseerimine: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; hoitakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest