RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP-celler er en genetisk modificeret afart af den murine RAW 264.7-makrofaglignende cellelinje, som stammer fra en tumor hos en voksen mus af monocyt-/makrofag-afstamning. Disse celler er blevet genetisk modificeret til at udtrykke grønt fluorescerende protein (GFP), hvilket muliggør visualisering i realtid af cellulære processer såsom morfologi, migration og fagocytisk aktivitet under fluorescensmikroskopi. Den oprindelige RAW 264.7-linje anvendes i vid udstrækning som model for medfødte immunresponser, da den bevarer mange funktionelle egenskaber hos aktiverede makrofager, herunder evnen til at producere cytokiner, nitrogenoxid og reaktive iltarter ved stimulering.

Inkorporeringen af GFP muliggør dynamisk, ikke-invasiv overvågning af makrofagernes adfærd in vitro, hvilket gør RAW 264.7-GFP-celler særligt værdifulde til levende-celle-billeddannelsesundersøgelser og high-content screening-anvendelser. Disse celler reagerer kraftigt på proinflammatoriske stimuli såsom lipopolysaccharid (LPS) og interferon-gamma, hvilket fører til aktivering af signalveje, herunder NF-κB og MAPK. Dette gør dem til en nyttig model til undersøgelse af inflammatorisk signalering, interaktioner mellem vært og patogen samt virkningen af farmakologiske midler på makrofagaktivering. Ligesom med den oprindelige stamme bør forskere dog tage højde for, at modeller afledt af RAW 264.7 kan udvise ændrede reguleringsveje sammenlignet med primære makrofager.

Genetisk modifikation: Stabilt modificeret ved replikationsinkompetent lentiviral transduktion til at udtrykke ZsGreen1-reporteren (grønt fluorescerende protein); opbevares som en polyklonal population under puromycin-selektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-indeslutning.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring