RAW 264.7-GFP

Bunky RAW 264.7-GFP sú geneticky modifikovaným derivátom myšej bunky podobnej makrofágu z línie RAW 264.7, ktorá pochádza z nádoru dospelého myši z línie monocytov/makrofágov. Tieto bunky boli geneticky upravené tak, aby exprimovali zelený fluorescenčný proteín (GFP), čo umožňuje vizualizáciu bunkových procesov, ako sú morfológia, migrácia a fagocytárna aktivita, v reálnom čase pomocou fluorescenčnej mikroskopie. Pôvodná línia RAW 264.7 sa široko používa ako model vrodených imunitných reakcií, keďže si zachováva mnohé funkčné charakteristiky aktivovaných makrofágov, vrátane schopnosti produkovať po stimulácii cytokíny, oxid dusnatý a reaktívne formy kyslíka.

Vďaka začleneniu GFP je možné dynamicky a neinvazívne sledovať správanie makrofágov in vitro, čo robí bunky RAW 264.7-GFP obzvlášť cennými pre štúdie zobrazovania živých buniek a aplikácie vysokokapacitného skríningu. Tieto bunky silne reagujú na prozápalové podnety, ako sú lipopolysacharid (LPS) a interferón-gamma, čo vedie k aktivácii signálnych dráh vrátane NF-κB a MAPK. Vďaka tomu sú užitočným modelom na skúmanie zápalovej signalizácie, interakcií medzi hostiteľom a patogénom a účinkov farmakologických látok na aktiváciu makrofágov. Rovnako ako v prípade rodičovskej línie by však výskumníci mali zohľadniť, že modely odvodené od buniek RAW 264.7 môžu vykazovať zmenené regulačné dráhy v porovnaní s primárnymi makrofágmi.

Genetická modifikácia: Stabilne modifikované replikačne nekompetentnou lentivírusovou transdukciou na expresiu reportérového zeleného fluorescenčného proteínu ZsGreen1; udržiavané ako polyklonálna populácia pod selekciou puromycínom (1–5 µg/ml). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke