RAW 264.7-GFP

RAW 264.7-GFP-Zellen sind ein genetisch modifiziertes Derivat der murinen makrophagenähnlichen Zelllinie RAW 264.7, die aus einem Tumor einer erwachsenen Maus der Monozyten-/Makrophagen-Linie stammt. Diese Zellen wurden so verändert, dass sie grün fluoreszierendes Protein (GFP) exprimieren, was die Echtzeit-Visualisierung zellulärer Prozesse wie Morphologie, Migration und phagozytische Aktivität unter dem Fluoreszenzmikroskop ermöglicht. Die Elternlinie RAW 264.7 wird häufig als Modell für angeborene Immunantworten verwendet, da sie viele funktionelle Eigenschaften aktivierter Makrophagen beibehält, darunter die Fähigkeit, bei Stimulation Zytokine, Stickstoffmonoxid und reaktive Sauerstoffspezies zu produzieren.

Die Einbringung von GFP ermöglicht eine dynamische, nicht-invasive Überwachung des Makrophagenverhaltens in vitro, wodurch sich RAW 264.7-GFP-Zellen besonders gut für Live-Cell-Imaging-Studien und High-Content-Screening-Anwendungen eignen. Diese Zellen reagieren stark auf proinflammatorische Reize wie Lipopolysaccharid (LPS) und Interferon-gamma, was zur Aktivierung von Signalwegen wie NF-κB und MAPK führt. Dies macht sie zu einem nützlichen Modell für die Untersuchung von Entzündungssignalen, Wirt-Pathogen-Interaktionen und den Auswirkungen pharmakologischer Wirkstoffe auf die Makrophagenaktivierung. Wie bei der Elternlinie sollten Forscher jedoch berücksichtigen, dass von RAW 264.7 abgeleitete Modelle im Vergleich zu primären Makrophagen veränderte Regulationswege aufweisen können.

Genetische Modifikation: Stabil modifiziert durch replikationsinkompetente lentivirale Transduktion zur Expression des grün fluoreszierenden Proteins ZsGreen1 als Reporter; wird als polyklonale Population unter Puromycin-Selektion (1–5 µg/ml) gehalten. Sicherheitsstufe S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung