VK2/E6E7

La lignée cellulaire VK2/E6E7 est une lignée de cellules épithéliales vaginales humaines qui a été immortalisée à l’aide des oncogènes E6 et E7 du virus du papillome humain (VPH) de type 16. Cette méthode d’immortalisation prolonge la durée de vie réplicative des cellules tout en préservant bon nombre des caractéristiques fonctionnelles et morphologiques des cellules épithéliales vaginales normales. Les cellules VK2/E6E7 font partie d’un panel de lignées cellulaires immortalisées par le HPV16/E6E7 qui comprend également des cellules épithéliales ectocervicales (Ect1/E6E7) et endocervicales (End1/E6E7), offrant ainsi un modèle in vitro complet pour l’étude de la biologie du tractus génital inférieur féminin.

Les cellules VK2/E6E7 présentent une morphologie de type kératinocytaire et forment des colonies peu organisées en culture, ce qui les distingue de l’aspect plus stratifié des cellules ectocervicales. Elles expriment plusieurs marqueurs de différenciation épithéliale, notamment les cytokératines CK8, CK18, CK19 et l’involucrine. Il est intéressant de noter qu’elles expriment également les CK10 et CK13, des marqueurs associés à la différenciation suprabasale dans l’épithélium squameux stratifié, ce qui suggère qu’elles conservent des caractéristiques clés des cellules épithéliales vaginales normales. De plus, les cellules VK2/E6E7 expriment faiblement la composante sécrétoire (SC) du récepteur polymérique des immunoglobulines, qui est généralement absente du tissu vaginal mais dont l’expression est régulée à la hausse dans cette lignée cellulaire. Ces caractéristiques font de la lignée VK2/E6E7 un outil précieux pour l’étude de la fonction épithéliale vaginale, des interactions hôte-pathogène et de l’immunologie muqueuse, ainsi que pour l’évaluation d’agents pharmacologiques destinés à une application intravaginale.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.