VK2/E6E7

Die VK2/E6E7-Zelllinie ist eine menschliche Vaginalepithelzelllinie, die mithilfe der Onkogene E6 und E7 des humanen Papillomavirus (HPV) Typ 16 immortalisiert wurde. Diese Immortalisierungsmethode verlängert die replikative Lebensdauer der Zellen und bewahrt gleichzeitig viele der funktionellen und morphologischen Eigenschaften normaler Vaginalepithelzellen. VK2/E6E7-Zellen sind Teil eines Panels von HPV16/E6E7-immortalisierten Zelllinien, zu denen auch ektozervikale (Ect1/E6E7) sowie endozervikale (End1/E6E7) Epithelzellen umfasst und somit ein umfassendes In-vitro-Modell zur Untersuchung der Biologie des weiblichen unteren Genitaltrakts bietet.

VK2/E6E7-Zellen weisen eine keratinozytenähnliche Morphologie auf und bilden in Kultur locker organisierte Kolonien, die sich vom stärker geschichteten Erscheinungsbild ektozervikaler Zellen unterscheiden. Sie exprimieren mehrere Marker der Epitheldifferenzierung, darunter die Zytokeratine CK8, CK18, CK19 und Involucrin. Interessanterweise exprimieren sie auch CK10 und CK13, Marker, die mit der suprabasalen Differenzierung im mehrschichtigen Plattenepithel assoziiert sind, was darauf hindeutet, dass sie wesentliche Merkmale normaler vaginaler Epithelzellen beibehalten. Zudem exprimieren VK2/E6E7-Zellen schwach die sekretorische Komponente (SC) des polymeren Immunglobulinrezeptors, die im Vaginalgewebe typischerweise fehlt, in dieser Zelllinie jedoch hochreguliert ist. Diese Eigenschaften machen VK2/E6E7 zu einem wertvollen Werkzeug für die Untersuchung der Funktion des Vaginalepithels, der Wirt-Erreger-Interaktionen und der Schleimhautimmunologie sowie für die Prüfung von pharmakologischen Wirkstoffen, die für die intravaginale Anwendung vorgesehen sind.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung