Přejít na obsah
VK2/E6E7
Tkáň
Vagina, sliznice
Nemoc
Endometrióza
Synonyma
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Dokumenty

VK2/E6E7

Cell line · Číslo výrobku 305653

Buněčná linie VK2/E6E7 je lidská vaginální epiteliální buněčná linie, která byla imortalizována pomocí onkogenů E6 a E7 lidského papilomaviru (HPV) typu 16...

€375.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie VK2/E6E7 je linie lidských vaginálních epitelových buněk, která byla imortalizována pomocí onkogenů E6 a E7 lidského papilomaviru (HPV) typu 16. Tato metoda imortalizace prodlužuje replikační životnost buněk a zároveň zachovává mnoho funkčních a morfologických charakteristik normálních vaginálních epiteliálních buněk. Buňky VK2/E6E7 jsou součástí panelu buněčných linií imortalizovaných HPV16/E6E7, který zahrnuje také ektocervikální (Ect1/E6E7) a endocervikální (End1/E6E7) epiteliální buňky, čímž poskytují komplexní in vitro model pro studium biologie dolních ženských pohlavních cest.

Buňky VK2/E6E7 vykazují morfologii podobnou keratinocytům a v kultuře tvoří volně organizované kolonie, což se liší od více vrstevnatého vzhledu ektocervikálních buněk. Exprimují několik markerů epiteliální diferenciace, včetně cytokeratinů CK8, CK18, CK19 a involucrinu. Zajímavé je, že exprimují také CK10 a CK13, markery spojené se suprabazální diferenciací ve vrstevnatém dlaždicovém epitelu, což naznačuje, že si zachovávají klíčové charakteristiky normálních vaginálních epiteliálních buněk. Kromě toho buňky VK2/E6E7 slabě exprimují sekreční složku (SC) polymerního receptoru imunoglobulinu, která ve vaginální tkáni obvykle chybí, ale v této buněčné linii je její exprese zvýšená. Díky těmto vlastnostem je VK2/E6E7 cenným nástrojem pro studium funkce vaginálního epitelu, interakcí mezi hostitelem a patogenem a imunologie sliznic, stejně jako pro testování farmakologických látek určených k intravaginální aplikaci.

Tkáň
Vagina, sliznice
Nemoc
Endometrióza
Aplikace
3D buněčná kultura
Synonyma
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
2

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové
Typ buňky
Epitelové
Doba zdvojnásobení
24 hodin

04Identifikátory

Citace
VK2/E6E7 (katalogové číslo Cytion 305653)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
HPV-16 E6/E7
Exprese antigenu
Cytokeratiny 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); faktor stimulující tvorbu kolonií makrofágů (M-CSF); transformační růstový faktor beta1; interleukin 8 (IL-8); prostaglandin E2; inhibitor sekreční leukoproteinázy; polymerní receptor imunoglobulinu.

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
32 let
Etnická příslušnost
Nespecifikováno