VK2/E6E7

VK2/E6E7 šūnu līnija ir cilvēka maksts epitēlija šūnu līnija, kas tika imortalizēta, izmantojot cilvēka papilomas vīrusa (HPV) 16. tipa E6 un E7 onkogēnus. Šī imortalizācijas metode pagarina šūnu replikācijas dzīves ilgumu, vienlaikus saglabājot daudzas normālu maksts epitēlija šūnu funkcionālās un morfoloģiskās īpašības. VK2/E6E7 šūnas ir daļa no HPV16/E6E7 imortalizēto šūnu līniju kopuma, kurā ietilpst arī ekto- (Ect1/E6E7) un endocervikālās (End1/E6E7) epitēlija šūnas, nodrošinot visaptverošu in vitro modeli sieviešu apakšējo dzimumorgānu bioloģijas pētīšanai.

VK2/E6E7 šūnas uzrāda keratinocītiem līdzīgu morfoloģiju un kultūrā veido neblīvi organizētas kolonijas, atšķirībā no ektocervikālo šūnu vairāk slāņotās izskata. Tās ekspresē vairākus epitēlija diferenciācijas marķierus, tostarp citocheratīnus CK8, CK18, CK19 un involukrīnu. Interesanti, ka tās ekspresē arī CK10 un CK13 — marķierus, kas saistīti ar suprabazālo diferenciāciju slāņotajā plakanšūnu epitēlijā, liecinot, ka tās saglabā normālo maksts epitēlija šūnu galvenās īpašības. Turklāt VK2/E6E7 šūnas vāji ekspresē polimērā imūnglobulīna receptora sekretoro komponentu (SC), kas parasti nav sastopams maksts audos, bet šajā šūnu līnijā tiek regulēts augšup. Šīs īpašības padara VK2/E6E7 par vērtīgu rīku maksts epitēlija funkcijas, saimnieka un patogēna mijiedarbības un gļotādas imunoloģijas pētīšanai, kā arī intravaginālai lietošanai paredzētu farmakoloģisko līdzekļu testēšanai.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu