VK2/E6E7

La línea celular VK2/E6E7 es una línea celular epitelial vaginal humana que se inmortalizó utilizando los oncogenes E6 y E7 del virus del papiloma humano (VPH) tipo 16. Este método de inmortalización prolonga la vida replicativa de las células al tiempo que conserva muchas de las características funcionales y morfológicas de las células epiteliales vaginales normales. Las células VK2/E6E7 forman parte de un panel de líneas celulares inmortalizadas con HPV16/E6E7 que también incluye células epiteliales ectocervicales (Ect1/E6E7) y endocervicales (End1/E6E7), lo que proporciona un modelo in vitro integral para estudiar la biología del tracto genital inferior femenino.

Las células VK2/E6E7 presentan una morfología similar a la de los queratinocitos y forman colonias poco organizadas en cultivo, a diferencia del aspecto más estratificado de las células ectocervicales. Expresan varios marcadores de diferenciación epitelial, entre ellos las citoqueratinas CK8, CK18, CK19 e involucrina. Curiosamente, también expresan CK10 y CK13, marcadores asociados con la diferenciación suprabasal en el epitelio escamoso estratificado, lo que sugiere que conservan características clave de las células epiteliales vaginales normales. Además, las células VK2/E6E7 expresan débilmente el componente secretor (SC) del receptor polimérico de inmunoglobulina, que normalmente está ausente en el tejido vaginal, pero que se regula al alza en esta línea celular. Estas características convierten a la VK2/E6E7 en una herramienta valiosa para estudiar la función del epitelio vaginal, las interacciones entre el huésped y los patógenos y la inmunología de las mucosas, así como para evaluar agentes farmacológicos destinados a la aplicación intravaginal.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.