Tartalomra ugrás
VK2/E6E7
Szövet
Hüvely, nyálkahártya
Betegség
Endometriózis
Szinonimák
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Dokumentumok

VK2/E6E7

Cell line · Termékszám 305653

A VK2/E6E7 sejtvonal egy emberi hüvelyi hámsejtvonal, amelyet a 16-os típusú humán papillomavírus (HPV) E6 és E7 onkogénjeinek felhasználásával tették halhatatlanná...

€375.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A VK2/E6E7 sejtvonal egy emberi hüvelyi hámsejtvonal, amelyet a 16-os típusú humán papillomavírus (HPV) E6 és E7 onkogénjeinek felhasználásával tették halhatatlanná. Ez az immortilizációs módszer meghosszabbítja a sejtek replikációs élettartamát, miközben megőrzi a normál hüvelyi hámsejtek számos funkcionális és morfológiai jellemzőjét. A VK2/E6E7 sejtek az HPV16/E6E7-tel immortilizált sejtvonalak csoportjához tartoznak, amelybe az ektocervikális (Ect1/E6E7) és endocervikális (End1/E6E7) hámsejteket is magában foglal, így átfogó in vitro modellt biztosít a női alsó nemi traktus biológiájának tanulmányozásához.

A VK2/E6E7 sejtek keratinocita-szerű morfológiát mutatnak, és tenyészetben lazán szerveződő kolóniákat képeznek, eltérve az ektocervikális sejtek rétegesebb megjelenésétől. Számos epiteliális differenciálódási markert expresszálnak, beleértve a CK8, CK18, CK19 citokeratinokat és az involukrint. Érdekes módon a CK10-et és a CK13-at is expresszálják, amelyek a réteges laphámban a szupra bazális differenciálódáshoz kapcsolódó markerek, ami arra utal, hogy megőrzik a normális hüvelyi hámsejtek kulcsfontosságú jellemzőit. Ezen felül a VK2/E6E7 sejtek gyengén expresszálják a polimer immunglobulin-receptor szekréciós komponensét (SC), amely jellemzően hiányzik a hüvelyi szövetből, de ebben a sejtvonalban fokozottan expresszálódik. Ezek a tulajdonságok a VK2/E6E7-et értékes eszközzé teszik a hüvelyi hámfunkció, a gazda-kórokozó kölcsönhatások és a nyálkahártya-immunológia tanulmányozásához, valamint az intravaginális alkalmazásra szánt farmakológiai szerek teszteléséhez.

Szövet
Hüvely, nyálkahártya
Betegség
Endometriózis
Alkalmazások
3D sejtkultúra
Szinonimák
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
2

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Sejttípus
Epithelialis
Kettőzési idő
24 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
VK2/E6E7 (Cytion katalógusszám: 305653)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
HPV-16 E6/E7
Antigén-expresszió
8-as (CK8), 10-es (CK10), 13-as (CK13), 18-as (CK18) és 19-es (CK19) cito-keratinok; makrofág-kolónia-stimuláló faktor (M-CSF); transzformáló növekedési faktor béta-1; interleukin 8 (IL-8); prosztaglandin E2; szekretorikus leukoproteináz-gátló; polimer immunglobulin-receptor.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
32 év
Etnikai hovatartozás
Meghatározatlan