VK2/E6E7

VK2/E6E7-cellelinjen er en human vaginal epitelcellelinje som ble gjort udødelig ved hjelp av onkogenene E6 og E7 fra humant papillomavirus (HPV) type 16. Denne immortalisasjonsmetoden forlenger cellenes replikative levetid samtidig som mange av de funksjonelle og morfologiske egenskapene til normale vaginale epitelceller bevares. VK2/E6E7-celler inngår i et panel av HPV16/E6E7-immortalisert cellelinjer som også omfatter ektocervikale (Ect1/E6E7) og endocervikale (End1/E6E7) epitelceller, noe som gir en omfattende in vitro-modell for å studere biologien i kvinnens nedre kjønnsorganer.

VK2/E6E7-celler har en keratinocyttlignende morfologi og danner løst organiserte kolonier i kultur, noe som skiller seg fra det mer lagdelte utseendet til ektocervikale celler. De uttrykker flere epiteliale differensieringsmarkører, blant annet cytokeratinene CK8, CK18, CK19 og involucrin. Interessant nok uttrykker de også CK10 og CK13, markører assosiert med suprabasal differensiering i lagdelt plateepitel, noe som tyder på at de beholder viktige egenskaper ved normale vaginale epitelceller. I tillegg uttrykker VK2/E6E7-celler i svak grad den sekretoriske komponenten (SC) av den polymere immunoglobulinreseptoren, som vanligvis er fraværende i vaginalt vev, men som er oppregulert i denne cellelinjen. Disse egenskapene gjør VK2/E6E7 til et verdifullt verktøy for å studere vaginal epitelial funksjon, interaksjoner mellom vert og patogen og slimhinneimmunologi, samt for å teste farmakologiske midler beregnet på intravaginal anvendelse.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring