VK2/E6E7

VK2/E6E7-solulinja on ihmisen emättimen epiteelisolulinja, joka on ikuistettu ihmisen papilloomaviruksen (HPV) tyypin 16 E6- ja E7-onkogeenien avulla. Tämä ikuistamismenetelmä pidentää solujen replikaatioikää säilyttäen samalla monia normaalien emättimen epiteelisolujen toiminnallisia ja morfologisia ominaisuuksia. VK2/E6E7-solut kuuluvat HPV16/E6E7-ikuistettujen solulinjojen ryhmään, johon kuuluvat myös kohdunkaulan ulko-osan (Ect1/E6E7) ja kohdunkaulan sisäosan (End1/E6E7) epiteelisolut, mikä tarjoaa kattavan in vitro -mallin naisen alempien sukupuolielinten biologian tutkimiseen.

VK2/E6E7-solut ovat morfologialtaan keratinosyyttien kaltaisia ja muodostavat viljelyssä löyhästi järjestäytyneitä pesäkkeitä, mikä eroaa kohdunkaulan ulko-osan solujen kerrostuneemmasta ulkonäöstä. Ne ilmentävät useita epiteelin erilaistumismarkkereita, mukaan lukien sytokeratiinit CK8, CK18, CK19 ja involukriini. Mielenkiintoista on, että ne ilmentävät myös CK10:tä ja CK13:a, jotka ovat merkkejä, jotka liittyvät kerrostuneen levyepiteelin suprabasaaliseen erilaistumiseen, mikä viittaa siihen, että ne säilyttävät normaalien emättimen epiteelisolujen keskeiset ominaisuudet. Lisäksi VK2/E6E7-solut ilmentävät heikosti polymeerisen immunoglobuliinireseptorin erityskomponenttia (SC), jota ei tyypillisesti esiinny emättimen kudoksessa, mutta jonka ilmentyminen on lisääntynyt tässä solulinjassa. Nämä ominaisuudet tekevät VK2/E6E7-solulinjasta arvokkaan työkalun emättimen epiteelin toiminnan, isäntä-patogeenivuorovaikutusten ja limakalvon immunologian tutkimiseen sekä emättimeen tarkoitettujen farmakologisten aineiden testaamiseen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa