VK2/E6E7

Linia komórkowa VK2/E6E7 to ludzka linia komórek nabłonka pochwy, którą uwieczniono przy użyciu onkogenów E6 i E7 pochodzących z wirusa brodawczaka ludzkiego (HPV) typu 16. Ta metoda uwiecznienia wydłuża replikacyjną długość życia komórek, zachowując jednocześnie wiele cech funkcjonalnych i morfologicznych normalnych komórek nabłonka pochwy. Komórki VK2/E6E7 stanowią część panelu linii komórkowych uwiecznionych za pomocą HPV16/E6E7, który obejmuje również komórki nabłonka szyjki macicy (Ect1/E6E7) oraz komórki nabłonka szyjki macicy (End1/E6E7), zapewniając kompleksowy model in vitro do badania biologii dolnych dróg rodnych u kobiet.

Komórki VK2/E6E7 wykazują morfologię podobną do keratynocytów i tworzą w hodowli luźno zorganizowane kolonie, co odróżnia je od bardziej warstwowego wyglądu komórek zewnątrzszyjki macicy. Ekspresjonują one kilka markerów różnicowania nabłonkowego, w tym cytokeratyny CK8, CK18, CK19 oraz involucrynę. Co ciekawe, wyrażają one również CK10 i CK13, markery związane z różnicowaniem nadpodstawnym w wielowarstwowym nabłonku płaskim, co sugeruje, że zachowują one kluczowe cechy prawidłowych komórek nabłonka pochwy. Ponadto komórki VK2/E6E7 wykazują słabą ekspresję składnika wydzielniczego (SC) polimerycznego receptora immunoglobulinowego, który zazwyczaj nie występuje w tkance pochwy, ale w tej linii komórkowej ulega zwiększonej ekspresji. Cechy te sprawiają, że linia VK2/E6E7 stanowi cenne narzędzie do badania funkcji nabłonka pochwy, interakcji między gospodarzem a patogenem oraz immunologii błon śluzowych, a także do testowania środków farmakologicznych przeznaczonych do stosowania dopochwowego.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym