VK2/E6E7

VK2/E6E7-cellelinjen er en human vaginal epitelcellelinje, der er blevet gjort udødelig ved hjælp af E6- og E7-onkogenerne fra humant papillomavirus (HPV) type 16. Denne immortalisationsmetode forlænger cellernes replikative levetid, samtidig med at mange af de funktionelle og morfologiske egenskaber ved normale vaginale epitelceller bevares. VK2/E6E7-celler indgår i et panel af HPV16/E6E7-immortaliserede cellelinjer, der også omfatter ektocervikale (Ect1/E6E7) og endocervikale (End1/E6E7) epitelceller, hvilket giver en omfattende in vitro-model til undersøgelse af biologien i kvindens nedre kønsorganer.

VK2/E6E7-celler udviser en keratinocytlignende morfologi og danner løst organiserede kolonier i kultur, hvilket adskiller sig fra det mere lagdelte udseende hos ektocervikale celler. De udtrykker flere epiteliale differentieringsmarkører, herunder cytokeratinerne CK8, CK18, CK19 og involucrin. Interessant nok udtrykker de også CK10 og CK13, markører forbundet med suprabasal differentiering i lagdelt pladeepitel, hvilket tyder på, at de bevarer nøglekarakteristika fra normale vaginale epitelceller. Derudover udtrykker VK2/E6E7-celler i svag grad den sekretoriske komponent (SC) af den polymere immunoglobulinreceptor, som typisk er fraværende i vaginalt væv, men som er opreguleret i denne cellelinje. Disse egenskaber gør VK2/E6E7 til et værdifuldt redskab til at studere vaginal epitelial funktion, interaktioner mellem vært og patogen samt slimhindeimmunologi, ligesom de er velegnede til test af farmakologiske midler beregnet til intravaginal anvendelse.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring