Prejsť na obsah
VK2/E6E7
Tkanivo
Vagina, sliznica
Choroba
Endometrióza
Synonymá
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Dokumenty

VK2/E6E7

Cell line · Číslo výrobku 305653

Bunka VK2/E6E7 je ľudská vaginálna epiteliálna bunka, ktorá bola imortalizovaná pomocou onkogénov E6 a E7 z ľudského papilomavírusu (HPV) typu 16...

€375.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka VK2/E6E7 je ľudská vaginálna epitelová bunka, ktorá bola imortalizovaná pomocou onkogénov E6 a E7 z ľudského papilomavírusu (HPV) typu 16. Táto metóda imortalizácie predlžuje replikačnú životnosť buniek a zároveň zachováva mnohé funkčné a morfologické charakteristiky normálnych vaginálnych epitelových buniek. Bunky VK2/E6E7 sú súčasťou súboru bunkových línií imortalizovaných HPV16/E6E7, ktoré zahŕňajú aj ektocervikálne (Ect1/E6E7) a endocervikálne (End1/E6E7) epitelové bunky, čím poskytujú komplexný in vitro model na štúdium biológie ženského dolného genitálneho traktu.

Bunky VK2/E6E7 vykazujú morfológiu podobnú keratinocytom a v kultúre tvoria voľne usporiadané kolónie, čo sa odlišuje od viac vrstevnatého vzhľadu ektocervikálnych buniek. Exprimujú viacero markerov epiteliálnej diferenciácie, vrátane cytokeratínov CK8, CK18, CK19 a involucrínu. Zaujímavé je, že exprimujú aj CK10 a CK13, markery spojené so suprabazálnou diferenciáciou vo vrstevnatom dlaždicovom epitelu, čo naznačuje, že si zachovávajú kľúčové charakteristiky normálnych vaginálnych epitelových buniek. Okrem toho bunky VK2/E6E7 slabo exprimujú sekrečnú zložku (SC) polymérneho receptora imunoglobulínu, ktorá sa v vaginálnom tkanive zvyčajne nevyskytuje, avšak v tejto bunkovej línii je jej expresia zvýšená. Vďaka týmto vlastnostiam je VK2/E6E7 cenným nástrojom na štúdium funkcie vaginálneho epitelu, interakcií medzi hostiteľom a patogénom a imunológie slizníc, ako aj na testovanie farmakologických látok určených na intravaginálne použitie.

Tkanivo
Vagina, sliznica
Choroba
Endometrióza
Aplikácie
3D kultivácia buniek
Synonymá
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
2

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Typ bunky
Epitelové
Doba zdvojnásobenia
24 hodín

04Identifikátory

Citácia
VK2/E6E7 (katalógové číslo Cytion 305653)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
HPV-16 E6/E7
Expresia antigénu
Cytokeratíny 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); faktor stimulujúci kolónie makrofágov (M-CSF); transformujúci rastový faktor beta1; interleukín 8 (IL-8); prostaglandín E2; inhibítor sekrečnej leukoproteinázy; polymérny receptor imunoglobulínu.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
32 rokov
Etnická príslušnosť
Nešpecifikované