Pereiti prie turinio
VK2/E6E7
Audinys
Makštis, gleivinė
Liga
Endometriozė
Sinonimai
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Dokumentai

VK2/E6E7

Cell line · Prekės numeris 305653

VK2/E6E7 ląstelių linija yra žmogaus makšties epitelio ląstelių linija, kuri buvo imortalizuota naudojant žmogaus papilomos viruso (HPV) 16 tipo E6 ir E7 onkogenus...

€375.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

VK2/E6E7 ląstelių linija yra žmogaus makšties epitelio ląstelių linija, kuri buvo imortalizuota naudojant žmogaus papilomos viruso (HPV) 16 tipo E6 ir E7 onkogenus. Šis nemirtingumo suteikimo metodas prailgina ląstelių replikacinį gyvenimo ciklą, tuo pačiu išsaugodamas daugelį normalių makšties epitelio ląstelių funkcinių ir morfologinių savybių. VK2/E6E7 ląstelės yra dalis HPV16/E6E7 nemirtingumo suteiktų ląstelių linijų rinkinio, į kurį taip pat įeina išorinės gimdos kaklelio (Ect1/E6E7) ir endocervikalines (End1/E6E7) epitelines ląsteles, sudarančias išsamų in vitro modelį moterų apatinių lytinių takų biologijai tirti.

VK2/E6E7 ląstelės pasižymi keratinocitams būdinga morfologija ir kultūroje sudaro laisvai organizuotas kolonijas, skirtingai nuo ektokervikalinių ląstelių, kurios atrodo labiau sluoksniuotos. Jos ekspresuoja keletą epitelio diferenciacijos žymenų, įskaitant citocheratinius CK8, CK18, CK19 ir invulkriną. Įdomu tai, kad jos taip pat ekspresuoja CK10 ir CK13 – žymenis, susijusius su suprabazine diferenciacija sluoksniuotame plokščiajame epitelio audinyje, o tai rodo, kad jos išlaiko pagrindines normalių makšties epitelio ląstelių savybes. Be to, VK2/E6E7 ląstelės silpnai ekspresuoja polimerinio imunoglobulino receptoriaus sekretorinį komponentą (SC), kurio paprastai nėra makšties audinyje, tačiau šioje ląstelių linijoje jo ekspresija yra padidėjusi. Dėl šių savybių VK2/E6E7 yra vertinga priemonė makšties epitelio funkcijos, šeimininko ir patogeno sąveikos bei gleivinės imunologijos tyrimams, taip pat makštyje vartojamų farmakologinių preparatų bandymams.

Audinys
Makštis, gleivinė
Liga
Endometriozė
Paraiškos
3D ląstelių kultūra
Sinonimai
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Ląstelių tipas
Epitelis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
24 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
VK2/E6E7 (Cytion katalogo numeris 305653)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
HPV-16 E6/E7
Antigeno ekspresija
Citocheratinai 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (M-CSF); transformuojantis augimo faktorius beta1; interleukinas 8 (IL-8); prostaglandinas E2; sekretorinės leukoproteinazės inhibitorius; polimerinis imunoglobulino receptorius.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
32 metai
Etninė priklausomybė
Nenustatyta