İçeriğe atla
VK2/E6E7
Doku
Vajina, Mukoza
Hastalık
Endometriozis
Eş anlamlılar
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

VK2/E6E7

Cell line · Ürün numarası 305653

VK2/E6E7 hücre hattı, insan papilloma virüsü (HPV) tip 16’dan elde edilen E6 ve E7 onkogenleri kullanılarak ölümsüzleştirilmiş bir insan vajinal epitel hücre hattıdır...

€375.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

VK2/E6E7 hücre hattı, insan papilloma virüsü (HPV) tip 16’nın E6 ve E7 onkogenleri kullanılarak ölümsüzleştirilmiş bir insan vajinal epitel hücre hattıdır. Bu ölümsüzleştirme yöntemi, normal vajinal epitel hücrelerinin işlevsel ve morfolojik özelliklerinin çoğunu korurken hücrelerin replikatif ömrünü uzatır. VK2/E6E7 hücreleri, ektoservikal (Ect1/E6E7) ve endoservikal (End1/E6E7) epitel hücrelerini de içeren ve kadın alt genital sisteminin biyolojisini incelemek için kapsamlı bir in vitro model sunan bir panelin parçasıdır.

VK2/E6E7 hücreleri, keratinosit benzeri bir morfoloji sergiler ve kültürde, ektoservikal hücrelerin daha tabakalı görünümünden farklı olarak gevşek organize koloniler oluşturur. Bu hücreler, sitokeratinler CK8, CK18, CK19 ve involukrin dahil olmak üzere çeşitli epitelyal farklılaşma belirteçlerini eksprese eder. İlginç bir şekilde, bu hücreler ayrıca tabakalı skuamöz epitelde suprabazal farklılaşma ile ilişkili belirteçler olan CK10 ve CK13'ü de eksprese ederler; bu da normal vajinal epitel hücrelerinin temel özelliklerini koruduklarını düşündürmektedir. Ek olarak, VK2/E6E7 hücreleri, vajinal dokuda tipik olarak bulunmayan ancak bu hücre hattında ekspresyonu artmış olan polimerik immünoglobulin reseptörünün salgı bileşenini (SC) zayıf bir şekilde eksprese eder. Bu özellikler, VK2/E6E7’yi vajinal epitel fonksiyonunu, konak-patojen etkileşimlerini ve mukozal immünolojiyi incelemek ve ayrıca intravajinal uygulama amaçlı farmakolojik ajanları test etmek için değerli bir araç haline getirmektedir.

Doku
Vajina, Mukoza
Hastalık
Endometriozis
Uygulamalar
3D hücre kültürü
Eş anlamlılar
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
2

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Epitelyal
İki katına çıkma süresi
24 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
VK2/E6E7 (Cytion katalog numarası 305653)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
HPV-16 E6/E7
Antijen ekspresyonu
Sitokeratinler 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); makrofaj koloni uyarıcı faktör (M-CSF); dönüştürücü büyüme faktörü beta1; interlökin 8 (IL-8); prostaglandin E2; salgı tipi lökoproteinaz inhibitörü; polimerik immünoglobulin reseptörü.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
32 yıl
Etnik köken
Belirtilmemiş