VK2/E6E7

A linha celular VK2/E6E7 é uma linha de células epiteliais vaginais humanas que foi imortalizada utilizando os oncogenes E6 e E7 do papilomavírus humano (HPV) do tipo 16. Este método de imortalização prolonga o tempo de vida replicativo das células, preservando simultaneamente muitas das características funcionais e morfológicas das células epiteliais vaginais normais. As células VK2/E6E7 fazem parte de um painel de linhas celulares imortalizadas com HPV16/E6E7, que inclui também células epiteliais ectocervicais (Ect1/E6E7) e endocervicais (End1/E6E7), proporcionando um modelo in vitro abrangente para o estudo da biologia do trato genital inferior feminino.

As células VK2/E6E7 apresentam uma morfologia semelhante à dos queratinócitos e formam colónias pouco organizadas em cultura, distinguindo-se da aparência mais estratificada das células ectocervicais. Expressam vários marcadores de diferenciação epitelial, incluindo as citoqueratinas CK8, CK18, CK19 e a involucrina. Curiosamente, também expressam CK10 e CK13, marcadores associados à diferenciação suprabasal no epitélio escamoso estratificado, sugerindo que mantêm características-chave das células epiteliais vaginais normais. Além disso, as células VK2/E6E7 expressam fracamente o componente secretório (SC) do recetor polimérico de imunoglobulina, que está normalmente ausente no tecido vaginal, mas cuja expressão está aumentada nesta linha celular. Estas características tornam a VK2/E6E7 uma ferramenta valiosa para o estudo da função epitelial vaginal, das interações hospedeiro-patógeno e da imunologia das mucosas, bem como para testar agentes farmacológicos destinados à aplicação intravaginal.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia