VK2/E6E7

La linea cellulare VK2/E6E7 è una linea cellulare epiteliale vaginale umana che è stata immortalizzata utilizzando gli oncogeni E6 ed E7 del papillomavirus umano (HPV) di tipo 16. Questo metodo di immortalizzazione prolunga la durata di vita replicativa delle cellule, preservando al contempo molte delle caratteristiche funzionali e morfologiche delle normali cellule epiteliali vaginali. Le cellule VK2/E6E7 fanno parte di un panel di linee cellulari immortalizzate con HPV16/E6E7 che comprende anche cellule epiteliali ectocervicali (Ect1/E6E7) ed endocervicali (End1/E6E7), fornendo un modello in vitro completo per lo studio della biologia del tratto genitale inferiore femminile.

Le cellule VK2/E6E7 presentano una morfologia simile a quella dei cheratinociti e formano colonie organizzate in modo poco compatto in coltura, a differenza dell’aspetto più stratificato delle cellule ectocervicali. Esse esprimono diversi marcatori di differenziazione epiteliale, tra cui le citocheratine CK8, CK18, CK19 e l’involucrina. È interessante notare che esprimono anche CK10 e CK13, marcatori associati alla differenziazione soprabasale nell’epitelio squamoso stratificato, il che suggerisce che conservino caratteristiche chiave delle normali cellule epiteliali vaginali. Inoltre, le cellule VK2/E6E7 esprimono debolmente la componente secretoria (SC) del recettore polimerico delle immunoglobuline, che è tipicamente assente nel tessuto vaginale ma è sovraregolata in questa linea cellulare. Queste caratteristiche rendono la linea VK2/E6E7 uno strumento prezioso per lo studio della funzione dell’epitelio vaginale, delle interazioni ospite-patogeno e dell’immunologia delle mucose, nonché per la sperimentazione di agenti farmacologici destinati all’applicazione intravaginale.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia