Skip to content
VK2/E6E7
Tissue
Âm đạo, Niêm mạc
Disease
Bệnh lạc nội mạc tử cung
Synonyms
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Documents

VK2/E6E7

Cell line · Product number 305653

The VK2/E6E7 cell line is a human vaginal epithelial cell line that was immortalized using the E6 and E7 oncogenes from human papillomavirus (HPV) type 16...

€375.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào VK2/E6E7 là một dòng tế bào biểu mô âm đạo của người đã được bất tử hóa bằng cách sử dụng các gen gây ung thư E6 và E7 từ vi-rút u nhú ở người (HPV) tuýp 16. Phương pháp bất tử hóa này giúp kéo dài tuổi thọ nhân lên của các tế bào đồng thời bảo tồn nhiều đặc điểm chức năng và hình thái của các tế bào biểu mô âm đạo bình thường. Các tế bào VK2/E6E7 là một phần của nhóm các dòng tế bào được bất tử hóa bằng HPV16/E6E7, trong đó còn bao gồm các tế bào biểu mô cổ tử cung ngoài (Ect1/E6E7) và tế bào biểu mô cổ tử cung trong (End1/E6E7), cung cấp một mô hình in vitro toàn diện để nghiên cứu sinh học của đường sinh dục dưới ở nữ.

Các tế bào VK2/E6E7 có hình thái giống tế bào sừng và tạo thành các cụm tế bào tổ chức lỏng lẻo trong môi trường nuôi cấy, khác biệt so với hình thái nhiều lớp đặc trưng của các tế bào biểu mô cổ tử cung ngoài. Chúng biểu hiện một số dấu hiệu biệt hóa biểu mô, bao gồm các cytokeratin CK8, CK18, CK19 và involucrin. Điều thú vị là chúng cũng biểu hiện CK10 và CK13, các dấu hiệu liên quan đến sự biệt hóa trên lớp đáy trong biểu mô vảy nhiều lớp, cho thấy chúng vẫn giữ được các đặc điểm chính của tế bào biểu mô âm đạo bình thường. Ngoài ra, các tế bào VK2/E6E7 biểu hiện yếu thành phần tiết (SC) của thụ thể immunoglobulin đa phân tử, vốn thường vắng mặt trong mô âm đạo nhưng lại được tăng biểu hiện trong dòng tế bào này. Những đặc điểm này khiến VK2/E6E7 trở thành một công cụ quý giá để nghiên cứu chức năng biểu mô âm đạo, tương tác giữa vật chủ và mầm bệnh, và miễn dịch niêm mạc, cũng như để thử nghiệm các tác nhân dược lý dành cho ứng dụng nội âm đạo.

Tissue
Âm đạo, Niêm mạc
Disease
Bệnh lạc nội mạc tử cung
Applications
văn hóa tế bào 3D
Synonyms
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
Thượng bì
Cell type
Thượng bì
Doubling time
24 giờ

04Identifiers

Citation
VK2/E6E7 (Mã sản phẩm Cytion 305653)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Expression and susceptibility

Protein expression
HPV-16 E6/E7
Antigen expression
Cytokeratin 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); yếu tố kích thích tạo khuẩn lạc đại thực bào (M-CSF); yếu tố tăng trưởng biến đổi beta1; interleukin 8 (IL-8); prostaglandin E2; chất ức chế leukoproteinase tiết ra; thụ thể immunoglobulin đa phân tử.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
32 năm
Ethnicity
Không xác định