Skip to content
VK2/E6E7
Tissue
ช่องคลอด, เยื่อบุ
Disease
เยื่อบุโพรงมดลูกเจริญผิดที่
Synonyms
Vk2/E6E7, VK-2/E6E7, VK2 (E6/E7), VK2

Documents

VK2/E6E7

Cell line · Product number 305653

The VK2/E6E7 cell line is a human vaginal epithelial cell line that was immortalized using the E6 and E7 oncogenes from human papillomavirus (HPV) type 16...

€375.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายเซลล์ VK2/E6E7 เป็นสายเซลล์เยื่อบุช่องคลอดของมนุษย์ที่ได้รับการทำให้เป็นเซลล์อมตะโดยใช้ยีนก่อมะเร็ง E6 และ E7 จากไวรัสแพปพิโลมาของมนุษย์ (HPV) ชนิด 16 วิธีการทำให้เซลล์เป็นอมตะนี้ช่วยยืดอายุการแบ่งตัวของเซลล์ ขณะเดียวกันก็รักษาลักษณะการทำงานและรูปร่างของเซลล์เยื่อบุช่องคลอดปกติไว้ได้หลายประการ เซลล์ VK2/E6E7 เป็นส่วนหนึ่งของชุดเซลล์ไลน์ที่ถูกทำให้เป็นอมตะด้วย HPV16/E6E7 ซึ่งยังรวมถึงเซลล์เยื่อบุปากมดลูกส่วนนอก (Ect1/E6E7) และเซลล์เยื่อบุปากมดลูกส่วนใน (End1/E6E7) ซึ่งให้แบบจำลองในหลอดทดลองที่ครบถ้วนสำหรับการศึกษาชีววิทยาของทางเดินสืบพันธุ์ส่วนล่างของสตรี

เซลล์ VK2/E6E7 มีรูปร่างคล้ายเซลล์เคราติโนไซต์ และก่อตัวเป็นอาณานิคมที่จัดเรียงอย่างหลวมๆ ในวัฒนธรรม ซึ่งแตกต่างจากลักษณะที่เรียงชั้นอย่างชัดเจนของเซลล์เยื่อบุปากมดลูกด้านนอก พวกมันแสดงตัวบ่งชี้การแยกตัวเป็นเซลล์เยื่อบุหลายชนิด รวมถึงไซโตเคราติน CK8, CK18, CK19 และอินวอลูคริน ที่น่าสนใจคือ เซลล์เหล่านี้ยังแสดงออก CK10 และ CK13 ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับการแยกตัวเหนือชั้นฐานในเยื่อบุผิวสแควมัสแบบชั้น ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์เหล่านี้ยังคงรักษาลักษณะสำคัญของเซลล์เยื่อบุผิวช่องคลอดปกติไว้ นอกจากนี้ เซลล์ VK2/E6E7 ยังแสดงออกอย่างอ่อนต่อส่วนประกอบที่หลั่ง (SC) ของตัวรับอิมมูโนโกลบูลินแบบพอลิเมอร์ ซึ่งโดยทั่วไปไม่มีอยู่ในเนื้อเยื่อช่องคลอด แต่ถูกเพิ่มการแสดงออกในสายเซลล์นี้ คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้ VK2/E6E7 เป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการศึกษาการทำงานของเยื่อบุช่องคลอด การปฏิสัมพันธ์ระหว่างเจ้าบ้านกับเชื้อโรค และภูมิคุ้มกันของเยื่อเมือก รวมถึงการทดสอบสารเภสัชกรรมที่ออกแบบมาเพื่อใช้ทางช่องคลอด

Tissue
ช่องคลอด, เยื่อบุ
Disease
เยื่อบุโพรงมดลูกเจริญผิดที่
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ
Synonyms
  • Vk2/E6E7
  • VK-2/E6E7
  • VK2 (E6/E7)
  • VK2

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This human vaginal epithelial cell line (VK2/E6E7) contains a plasmid construct encoding HPV16 E6/E7 sequences introduced via transfection, supporting immortalization of vaginal epithelium-derived cells. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
2

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Cell type
เยื่อบุผิว
Doubling time
24 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
VK2/E6E7 (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305653)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6471

05Expression and susceptibility

Protein expression
HPV-16 E6/E7
Antigen expression
ไซโตเคราติน 8 (CK8), 10 (CK10), 13 (CK13), 18 (CK18), 19 (CK19); ปัจจัยกระตุ้นการสร้างอาณานิคมของแมคโครฟาจ (M-CSF); ปัจจัยการเจริญเติบโตแบบแปลงสภาพเบต้า 1; อินเตอร์ลิวคิน 8 (IL-8); โพรสตาแกลนดิน E2; สารยับยั้งเลวโคโปรตีเนสแบบหลั่ง; ตัวรับอิมมูโนโกลบูลินแบบพอลิเมอร์.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
32 ปี
Ethnicity
ไม่ระบุ